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技術文章

人脂肪微血管內皮細胞,HAMECC細胞培養的過程

閱讀:148          發布時間:2024-6-27

人脂肪微血管內皮細胞,HAMECC細胞培養的一般過程:

一、準備工作

1.器皿的清潔、干燥和消毒;

2.培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌;

3.無菌室或超凈臺的清潔與消毒;

4.培養箱及其他儀器的檢查與調試等等。

二、取材

在無菌環境下從機體取出某種組織細胞。理論上各種動物和人體組織都可用于培養,但幼體組織尤其是胚胎組織更易培養。取材時應在無菌環境下盡快處理并培養。

三、培養

1.組織塊培養,直接放置于器皿底部,幾個小時后再加入培養基;細胞系培養,先行計數,按一定量接入器皿并直接加入培養基。細胞進入培養器皿后立即放入培養箱中,使細胞今早進入生長狀態。

2.每隔一定時間觀察細胞生長狀況、形態、有無污染、PH值以及二氧化碳濃度等等。

3.原代細胞一般有一段潛伏期,潛伏期內細胞不分裂,但可貼壁或游走。過了潛伏期細胞便進入分裂期。細胞長滿平底之后要代傳培養。

四、凍存及復蘇

一般采用-196℃的液氮凍存,凍存管中加入含有保護劑的培養基。復蘇即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃的水中迅速融解,然后將人脂肪微血管內皮細胞,HAMECC細胞轉入培養器皿中進行培養。


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