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技術(shù)文章

伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒設(shè)置PCR反應(yīng)

閱讀:240          發(fā)布時間:2020-4-21

伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒設(shè)置qPCR反應(yīng)(20μL體系,在樣品制備室進行)

1. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個

樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

2. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后后加):

注意事項:   

1、使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

2 、操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行,以避免交叉污染。 

3 、實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。

4、 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。

5、細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測

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