人雌二醇受體(ER)Elisa試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
實驗材料    抗原血清
試劑、試劑盒    碳酸鹽包被緩沖液PBSTBSA
儀器、耗材    96孔酶標板4℃冰箱恒溫培養箱分光光度計
人雌二醇受體(ER)Elisa試劑盒實驗步驟    
一、包被抗原
 
1. 用50mM 的碳酸鹽包被緩沖液（pH 9.6）溶解抗原，使抗原濃度為10-20 μg/ml，加100 μl/孔到96 孔酶標板，4℃放置過夜。
2. 第二天棄去包被液后，用PBST 洗滌3 次，每孔加入150 μl 1％ BSA 37℃封閉1 小時。
3. PBST 洗滌3 次后，每孔加入100 μl 不同倍比稀釋度的血清，并加入對照樣品，37℃孵育2 小時。
4. PBST 洗滌5 次后，加入100μl 稀釋后的HRP 標記的二抗，37℃孵育1 小時。
5. PBST 洗滌5 次后，顯色劑顯色20 min 后，酶標儀上讀取A405 吸收值。
 
二、包被細胞
 
1. 人雌二醇受體(ER)Elisa試劑盒在96 孔培養板上接種細胞數為1 x 104 cells/well，37℃過夜培養。
2. 第二天用PBS 洗滌培養板2-3 次。
3. 加入125 μl/well 10% Forma lin（1:10 稀釋）, 室溫下固定15 min。
4. 用ddH2O 洗滌培養板3 次，并晾干，儲藏在2-8℃備用。
5. 用PBST 洗滌3 次，每孔加入150 μl 1％ BSA 37℃封閉1 小時。
6. PBST 洗滌3 次后，每孔加入100 μl 不同倍比稀釋度的血清，并加入對照樣品，37℃孵育2 小時。
7. PBST 洗滌5 次后，加入100 μl 稀釋后的HRP 標記的二抗,37℃孵育1 小時。
8. PBST 洗滌5 次后，顯色劑顯色20 min 后，酶標儀上讀取A405 吸收值。50mM 的碳酸鹽包被緩沖液：0.05mol/L pH9.6 碳酸緩沖液,4℃，保存,Na2CO3 0.15 克, NaHCO3 0.293 克,蒸餾水稀釋至100 ml。                                                                                                                   

ABTS 作為底物進行顯色反應(10ml)：
² 0.2M Na2HPO4 2.4ml
² 0.1M 檸檬酸2.6ml
² ddH2O 5ml
² ABTS 5mg
² H2O2(30%) 4 ul（用前加入）