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細胞遷移的實驗
閱讀：848 發布時間：2020-12-11細胞遷移是指細胞在接收到內源或外源遷移信號后而產生的移動。細胞遷移是通過胞體形變進行的緩慢的定向移動，涉及細胞覓食、傷口*、胚胎發生、免疫反應、感染和癌癥轉移等生理現象。因此通過對細胞遷移的研究，對阻止癌癥轉移、異體植皮等醫學應用方面具有一定意義。
細胞侵襲實驗則是研究腫瘤細胞對基質膜消化后的遷移運動，腫瘤細胞須經。血管基底膜穿入深面間質后才能侵襲組織和轉移至遠處。
腫瘤細胞侵襲遷移能力的改變通常采用Transwell小室進行檢測。Transwell小室是一種膜濾器，也認為是一種有通透性的支架(Permeable Supports)。這層膜帶有微孔，孔徑大小0.1-12.0μm，根據不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜。
將Transwell小室放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上室內盛裝上層培養液，下室內盛裝下層培養液，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。將細胞種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可用影像到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。
技術應用
應用包括細胞遷移、趨化(趨化因子對細胞的定向誘導)，侵襲(癌細胞侵襲上指腫瘤細胞向局部侵犯或遠處轉移)，共培養(同一培養體系里，兩種細胞非接觸性培養)。細胞遷移侵襲上涉及多個步驟、高度完整的過程，在癌癥轉移、動脈粥樣硬化和關節炎等疾病惡化中起重要作用。
服務流程
1、客戶提供細胞實驗分組情況及實驗資料；
2、客戶提供檢測細胞。
3、客戶提供干預藥物。
4、客戶也可提供細胞；
孔板選擇
根據 transwell 板的不同，transwell 小室可以分為 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直徑的小室；根據孔徑的不同，從小孔徑到大孔徑又分為 0.4μm 規格、3μm 規格、5μm 規格、8μm 規格，不同實驗對小室孔徑的要求也不一樣。
小于 3μm 孔徑的小室，細胞不會遷移通過，研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，應該選擇 3μm 以下的孔徑。例如共培養實驗和 caco-2 細胞轉運模型實驗。
共培養實驗
常用 0.4、34μm，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產生的物質對細胞 A 的影響。
細胞遷移的實驗
要用 5.0、8.0、12.0μm 的小室，這樣上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數進入下室的細胞量可反映細胞的趨化能力、遷移能力和侵襲能力。
趨化性實驗
細胞 B 對細胞 A 的趨化作用，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產生的物質對細胞 A 的趨化作用；趨化因子對細胞的趨化作用，將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。
細胞遷移實驗
常用 8.0、12.0μm 膜，上室種細胞，下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子，細胞會向營養成分高的下室跑，計數進入下室的細胞量可反映細胞的遷移能力。
細胞侵襲實驗
常用 8.0、12.0μm 膜，原理與細胞遷移實驗類似。上室種細胞，下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子，細胞會向營養成分高的下室跑，但與細胞遷移實驗不同的是，聚碳酸酯膜上室側鋪上一層基質膠，用以模仿體內細胞外基質，細胞欲進入下室，先要分泌基質金屬蛋白酶（MMPs）將基質膠降解，方可通過聚碳酸酯膜。計數進入下室的細胞量可反映細胞的侵襲能力。