国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

組織及血液酸性磷酸酶（ACP）活性測定試劑盒說明書
微量法
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸，常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于
前列腺癌的輔助診斷。
測定原理：
在酸性環境中，ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚，苯酚與4-氨基安替和鐵青化鉀反應生
成紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測定510nm吸光度增加速率，來計算ACP活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器
和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1 瓶，4℃避光保存，變成藍綠色不能使用。
標準品：液體×1 支，2μmol/mL 酚標準液，4℃保存。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加
入1mL試劑一）進行冰浴勻漿，4℃、8000g 離心10min，取上清液待測。
2. 血液可直接測定，或者適當稀釋后測定。
測定：
1.分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到510nm ,蒸餾水調零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預熱30min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保
溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，加入4μL標準品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保
溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm 測定吸光度，記為A標準管。
5. 對照管：取EP管，加入40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入
試劑四120μL，混勻；后加入4μL上清液，混勻后于510nm測定吸光度，記為A對照管。
6. 測定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保
溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm 測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需做一次。
ACP 活性計算：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1. 血液中ACP活性計算
活性單位定義：37℃中每毫升血液每分鐘催化產生1μmol酚定義為1個酶活單位。
ACP活力(μmol/min/mL)= [C 標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V反總] ÷V樣
×V 樣總÷T= 6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)
2. 組織中ACP活性計算
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生1μmol酚定義為1個酶活單位。
ACP(μmol/min/mg prot)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 反總]
÷(Cpr×V 樣)÷T=6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘催化產生1μmol酚定義為1個酶活單位。
ACP (μmol/min/g)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 反總]÷(W×
V 樣÷V 樣總)÷T= 6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷W
C 標準品：2μmol/mL；V 反總：反應體系總體積（mL），205μL=0.205 mL；Cpr：上清液蛋
白質濃度，mg/mL；W ：樣品質量； V 樣：加入反應體系中上清液體積（mL），0.005mL；V 樣
總：提取液體積，1 mL；T：反應時間（min），15 min。
b.使用96孔板測定的計算公式如下
1. 血液中ACP活性計算
活性單位定義：37℃中每毫升血液每分鐘催化產生1μmol酚定義為1個酶活單位。
ACP活力(μmol/min/mL)= [C 標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V反總] ÷V樣
×V 樣總÷T= 6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)
2. 組織中ACP活性計算
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生1μmol 酚定義為1個酶活單位。
ACP(μmol/min/mg prot)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 反總]
÷(Cpr×V 樣)÷T=6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘催化產生1μmol酚定義為1個酶活單位。
ACP (μmol/min/g)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 反總]÷(W×
V 樣÷V 樣總)÷T= 6.8×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷W
C 標準品：2μmol/mL；V 反總：反應體系總體積（mL），205μL=0.205 mL；Cpr：上清液蛋
白質濃度，mg/mL；W ：樣品質量； V 樣：加入反應體系中上清液體積（mL），0.005mL；V 樣
總：提取液體積，1 mL；T：反應時間（min），15 min。
注意事項：
1、試劑二、試劑三和試劑四均需避光保存。
2、試劑四變藍綠色后不能再使用。
3、加入試劑四后必須立即混勻，否則顯色不*。
4、ACP不穩定，尤其在37℃和pH大于7的條件下活力喪失快，因此酸性磷酸酶樣品一般需當天
準備；血清樣品中，每毫升血清中加入10mg檸檬酸氫二鈉或者5mg硫酸氫鈉，使pH降至6.5
以下，或5ml血清加入30%醋酸溶液2～3滴，置于4℃可保存1周。