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小鼠胰島素（insulin）酶聯免疫檢測試劑盒
閱讀：968 發布時間：2020-6-8中文名稱小鼠胰島素酶聯免疫檢測試劑盒
英文名稱Mouse insulin elisa kit
樣品類型血清/血漿/細胞培養上清/尿液/組織樣本
檢測范圍0.17-5.5 ng/mL
靈敏度0.09 ng/mL
反應時間3.5h
背景介紹:
胰島素是糖代謝中主要的激素之一。胰腺的3細胞島細胞產生胰島素前體 蛋白，前體蛋白被加工成C肽和胰島素。它們以等摩爾濃度進入血循環中。成熟的 胰島素由A、B兩條鏈組成。這兩條鏈是通過兩個二硫鍵橋接形成有功能的胰島 素分子。血漿葡萄糖濃度的變化是胰島素產生并分泌的主要刺激因素，產生的 胰島素具有一些代謝調節作用。其主要的作用是，將外周血中糖轉運到肝臟中 貯存起來。一些諸如肝糖生成障礙或在促進血糖升高的激素諸如胰高血糖素、腎 上腺素、生長激素和皮質醇等作用下促進肝糖分解都可拮抗胰島素的作用。
［檢測原理:
Solarbio(Solarbio*)ELISA試劑盒采用基于雙抗體夾心法的醯聯免疫吸附檢 測技術。胰島素捕獲抗體已預包被于酶標板上，當同時加入標本或參考品和HRP 耦連的抗小鼠胰島素抗體時，其中胰島素的不同位點會與捕獲抗體和HRP偶聯 的抗小鼠胰島素抗體結合，形成夾心復合物，錨定在固相載體板上，其它游離的 成分通過洗滌的過程被除去。后加入顯色劑，若樣本中存在胰島素將會形成免 疫復合物，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質，在加入終止液 后呈黃色。通過酶標儀檢測，使其450nm處的OD值，胰島素濃度與OD450值之 間呈正比，通過參考品繪制標準曲線，對照未知樣本中OD值，即可算出標本中胰 島素濃度。
2. 靈敏度：
低可檢測小鼠Insulin濃度達0.1ng/ml,
20個零標準品濃度OD的平均值加上兩個標準差，計算相應的可檢測濃度。
3. 特異性：
不與IGF-U IGF-IU小鼠C肽、大鼠C肽反應，與豬胰島素、綿羊胰島素、大鼠胰 島素、牛胰島素及人胰島素分別有628%, 256%, 146%, 110%和195%交叉反 應。
4. 重復性：
板內，板間變異系數＜10%
5. 回收率：
在選取的健康小鼠血漿、細胞培養上清中加入3個不同濃度水平的小鼠Insulin計 算回收率。
I 樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) I |
血漿 | 93 | 86-101 |
細胞培養上清 | 95 | 87-103 |
6. 線性稀釋：
分別在選取的4份健康小鼠血漿和細胞培養上清中加入高濃度小Mlnsulin,在標 準曲線動力學范圍內進行稀釋，評估線性。
I稀釋比例 | 回收率(%) | 血漿 | 細胞培養上清I |
1:2 | 平均回收率(% ) | 96 | 102 |
范圍(％) | 88-105 | 92-113 | |
1:4 | 平均回收率(% ) | 98 | 103 |
范圍(％) | 90-107 | 94-112 |
注意事項:
1. 試劑盒應在有效期內使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在2-8P冰箱，已復溶但未用完的標準品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復30min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的 樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測，且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用1次性試管，槍頭，封板膜（淤）及潔凈塑料容 器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到 管壁及瓶蓋上，使用前清離心處理（5-10S即可），使管壁上的液體集中在管底 部，取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒 內含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結果準確，每次檢測均需做標準曲線。
I安全提示:
試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時請帶上手套并注意防護； 在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請用大量滑水滑 洗；檢測血液樣本及其它體液樣本時，請按國家生物實驗室安全防護有關管理規 定執行。
說明書 | 1份 | 1份 |
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自備實驗器材（不提供，可代購）1.png)
1. 酶標儀（主波長450nm,參考波長630nm）
2. 高精度移液器及一次性吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000 n I
3. 洗板機或洗瓶
4.