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免提PCR試劑盒
閱讀：360 發布時間：2019-9-5產品及特點 本產品是可以直接用新鮮的動物、植物、細菌樣品的裂解液進行PCR 擴增的試劑
盒，它具有下列特點:
1. 操作簡單，免去DNA 提取、蛋白去除、RNA 去除等步驟，15 分鐘即得用于PCR
的模板，一個實驗員每天可以篩選上千個樣品，尤其適用于大規模育種篩選和臨床
篩選。
2. 兼容性廣，可以用于幾乎所有的分子生物學樣品，包括細菌、昆蟲、真菌、各種植
物、各種動物、法醫樣品（包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛發、組織樣品、口
腔細胞和FTA 卡）、石蠟組織切片等。
3. 成本低廉，從提取到PCR 處理每個樣品的成本才一元左右，在大規模篩選時能節
約成本。
4. 環保健康，不使用任何有毒有害的試劑。
5. 本試劑盒足夠處理400 份樣品，足夠400 次20uL 體系的PCR。
規格及成分 成 份 編 號 十孔盒包裝
免提PCR 溶液A 成分一 13098 400 uL(白色蓋)
免提PCR 溶液A 成分二 130985b 800 uL(綠色蓋)
免提PCR 溶液B 130985c 1 mL×4(紅色蓋)
PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL×4(黃色蓋)
使用手冊 130985sc 1 份
運輸及保存 低溫運輸，溶液A 成分一和成分二、溶液B 可以常溫放置，PCR MagicMix 3.0 需要
-20℃保存。有效期一年。
自備試劑 PCR 引物和模板，超純水
使用方法 1. 配制溶液A 工作液。以配制1mL 工作液（足夠10 個樣品）為例：在一干凈塑料
管中加入10uL 溶液A 成分一，20uL 溶液A 成分二和970uL 超純水，充分混合
均勻即可。溶液A 工作液可室溫放置，但在一周內用完，不要長期放置。一
次檢測一個樣品需要100uL 溶液A 工作液，1mL 工作液足夠10 個樣品。如果待
測樣品數量為其他數字，配制的溶液A 工作液的體積需要做相應的調整。
2. 根據材料不同參考下表取少量樣品到一干凈的塑料離心管中。
樣品種類 取用量
動物組織 1-5 mg
鼠尾 2mm 長
血液樣品 不超過20 uL
植物葉片 1-5 mg
植物種子（去皮） 1-5 mg
酵母培養物 0.2-0.5mL 培養物沉淀
細菌培養物 0.2-0.5mL 培養物沉淀
注意：未列出樣品，用戶需要自己摸索用量。對富含多醌多酚的植物材料（如棉花），
組織使用量不要超過0.5mg。
3. 加入100 uL 溶液A 工作液，確保樣品被溶液淹埋。
4. 95℃保溫10 分鐘。
5. 待冷卻到常溫后加入10uL 溶液B 并混勻得細胞裂解液。
6. 直接用裂解液作為模板設置30 uL 體系的PCR 反應體系如下：
成分 用量
PCR MagicMix 3.0 10 uL
細胞裂解液（來于上步） 1-2 uL
自備PCR 引物1（10uM） 1 uL
自備PCR 引物2（10uM） 1 uL
補水到 20 uL
注意：裂解液體積不要超過PCR 體積的1/10。
7. 放入PCR 儀中進行PCR，PCR 參數需要根據引物Tm 值和靶分子長度等參數設
置。一般不低于35 次循環。
8. PCR 結束后取5-10 uL 直接上樣電泳（本產品不需要上樣液即可直接上樣），紅
色染料電泳速度相當于50 bp DNA 片段。
9. 如果沒有預期的擴增，細胞裂解液中可能是有PCR 抑制劑（植物、土壤和血液等
DNA 樣品常含此類抑制物），建議把細胞裂解液分別稀釋10 倍和100 倍再用3uL
進行PCR 擴增。也可以在PCR 體系中加入1/10 的本公司的PCR 抑制物清除劑
（CAT#：60804，30uL 體系中加3uL。需要另購），可能會對PCR 有幫助。
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