腺相關病毒（AAV）源自有缺陷的細小病毒，這些病毒依賴其他病毒（如腺病毒和皰疹病毒）提供的必需輔助功能，以實現高效的病毒復制和傳播。AAV與任何已知疾病沒病因學關聯，并且已成功用于在多種組織中建立高效且長期的基因表達，而不會引起顯著的細胞免疫反應或毒性。

AAV具有單鏈DNA基因組，長度約為4.7 kb。所有已鑒定的AAV血清型都具有三個關鍵特征，包括兩個AAV末端重復序列（ITR）、一個rep區和一個cap區。ITR能夠形成T形二級結構，是AAV復制、包裝、整合和拯救所需的唯1順式元件。rep區編碼四種重疊蛋白，分別命名為Rep78、Rep68、Rep52和Rep40，這是根據蛋白的表觀分子質量來命名的。除了在AAV復制中的明確作用外，Rep蛋白還調節AAV的包裝和特異性整合。cap區編碼三種結構蛋白：VP1、VP2和VP3。這三種蛋白共享相同的閱讀框。

Cell Biolabs的AAV無輔助病毒系統允許在不使用輔助病毒的情況下生產具有感染性的重組人腺相關病毒（rAAV）顆粒。在AAV無輔助病毒系統中，生產感染性AAV顆粒所需的大多數腺病毒基因產物由質粒pHelper提供（即E2A、E4和VA RNA基因），該質粒與人AAV載體DNA共轉染到細胞中。其余的腺病毒基因產物由293宿主細胞提供，這些細胞穩定表達腺病毒E1基因。通過消除對活輔助病毒的需求，AAV無輔助病毒系統提供了一個更安全、更便捷的基因傳遞系統。在AAV無輔助病毒系統中，rep和cap基因已從含有AAV-2 ITR的病毒載體中移除，并在質粒pAAV-RC上以反式提供。移除AAV的rep和cap基因使得可以在病毒基因組中插入感興趣的基因。Cell Biolabs的AAV無輔助病毒系統可以容納長達3 kb的插入片段。

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安全注意事項

請記住，您將處理含有感染性病毒的樣本。請遵循NIH推薦的針對所有含有BSL-2生物體的材料的指南。AAV無輔助病毒系統旨在最小化產生野生型AAV的可能性，但仍需采取預防措施，避免直接接觸病毒上清液。

文獻參考：

1. Auricchio, A., Hildinger, M., O'Connor, E., Gao, G. P. and Wilson, J. M. (2001) Hum Gene Ther 12:71–6.

2. Brument, N., Morenweiser, R., Blouin, V., Toublanc, E., Raimbaud, I. et al. (2002) Mol Ther 6:678–86.

3. Clark, K., Liu, X., McGrath, J., and Johnson, P. (1999) Hum. Gene Ther., 10, 1031-1039.

4. Graham, F. L., Smiley, J., Russell, W. C. and Nairn, R. (1977) J Gen Virol 36:59-74.

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