因子X(FX)是一種參與血液的血漿絲氨酸蛋白酶酶原凝結級聯。因子X從血漿中純化為雙鏈蛋白由45kDa重鏈和17kDa輕鏈組成。因子X重鏈在凝固過程中被幾種不同的蛋白酶裂解,包括固有的Xase復合物羅素蝰蛇毒液(RVV)和胰蛋白酶,以及外源性(組織因子/因子VIIa)途徑產生活性因子Xa酶。因子Xa,如凝血酶原的激活劑,占據連接兩種血液的中心位置凝血途徑 。
Nordic BioSite艾美捷人因子X ELISA(KSP-134)檢測原理:
人因子X ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒設計用于檢測人血漿、血清、牛奶、尿液、唾液中的因子X,CSF和細胞培養樣品。該分析采用定量夾心法酶免疫分析技術,在大約
4小時。一種針對人因子X的單克隆抗體已經預先包被在具有可移除條的96孔微孔板上。標準中的系數X和樣品被固定化抗體和生物素化人因子X特異性多克隆抗體鏈霉親和素過氧化物酶(SP)綴合物。所有未結合的材料都被沖走并加入過氧化物酶底物。顏色顯影停止并且測量顏色的強度。
Nordic BioSite人因子X ELISA(KSP-134)組分:
儲存條件:
•到達后,立即將套件組件存放在建議的位置截至到期日的溫度。
•將SP綴合物和生物素化抗體儲存在-20°C。
•儲存微孔板、濃縮稀釋劑(10x)、洗滌緩沖液、停止2-8°C下的溶液和染色基質。
•未使用的微孔板孔可與干燥劑包裝并重新密封??稍谡婵崭稍锲?。
•用稀釋劑重新配制前,將標準品儲存在2-8°C,-20°C用稀釋劑重建后。
Nordic BioSite人因子X ELISA(KSP-134)試劑準備:
•新鮮稀釋所有試劑并使所有試劑達到室溫使用前。
•MIX稀釋濃縮液(10倍):稀釋MIX稀釋稀釋濃縮液10-用試劑級水折疊以產生1x溶液。稀釋濃縮,確保徹-底沖洗瓶子以提取任何沉淀留在瓶中。輕輕混合1x溶液,直到結晶已完-全溶解。在2-8°C下儲存30天。
•人因X標準:重組人因X的標準(65 ng,7.8 mIU)與1.3 ml MIX稀釋劑混合,生成50 ng/ml(6
mIU/ml)標準儲備溶液。讓小瓶靜置10分鐘在稀釋之前輕輕攪拌。準備兩份或三份通過從標準儲備溶液(50ng/ml)與等體積的MIX稀釋劑混合2倍,6.25、3.125、1.563和0.781 ng/ml溶液。MIX稀釋劑用作零標準(0ng/ml)。應儲存任何剩余的儲備溶液-20°C,30天內使用。避免重復凍融循環
•生物素化人因子X抗體(100x):并稀釋所需量的抗體100-用MIX稀釋劑折疊以產生1x溶液。未稀釋的抗體應儲存在-20°C。
•洗滌緩沖液濃縮液(20x):稀釋洗滌緩沖液用試劑級水稀釋20倍以產生1x溶液。什么時候稀釋濃縮液,確保徹-底沖洗瓶子提取瓶中殘留的沉淀物。輕輕混合1x溶液,直到晶體完-全溶解。
•SP共軛物(100x):短暫降速SP共軛物并稀釋將所需量的綴合物用MIX稀釋劑稀釋100倍產生1x溶液。未稀釋的抗體應儲存在-20°C。
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