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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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WBC-LS02112中性蛋白酶分子特征及應(yīng)用介紹

時(shí)間:2023/2/3閱讀:258
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概述:

蛋白質(zhì)由氨基酸組成,是自然界中發(fā)現(xiàn)的最復(fù)雜的有機(jī)化合物之一。由鹽酸和蛋白酶分解成易被高等動(dòng)物的腸道和微生物有機(jī)體的細(xì)胞膜吸收的氨基酸包括人類在內(nèi)的每種動(dòng)物,必須要有足夠的蛋自質(zhì)來(lái)維持自身生長(zhǎng),來(lái)生成每個(gè)細(xì)胞所必需的氫基酸,一些特種蛋自質(zhì)還是某些特殊細(xì)胞、腺體分泌物、度和激素的功能性組成元素蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能夠水解(斷裂)蛋白質(zhì),也稱為蛋白水解酶。蛋白水解酶在許多生理和病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用,在食品和乳品加工業(yè)也有著廣泛應(yīng)用。

 

工作機(jī)理:

蛋白水解酶制劑能在中性條件下水解蛋白質(zhì)食品中的縮氨酸鍵,釋放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黃油和醬油生產(chǎn)中,添加中性蛋白酶可澄清發(fā)酵液中的霧氣。酵母在發(fā)酵階段的生長(zhǎng)可以通過(guò)懸浮蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化的氨基酸來(lái)加以促進(jìn),從而加速發(fā)酵并提高產(chǎn)量

 

艾美捷中性蛋白酶Dispase®)是一種非哺乳動(dòng)物來(lái)源的無(wú)(AOF)金屬中性蛋白酶,通過(guò)沃辛頓開(kāi)發(fā)的方法純化。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于原代細(xì)胞和二次(亞培養(yǎng))細(xì)胞培養(yǎng)的制備,因?yàn)樗鼘?duì)細(xì)胞膜溫和。這種蛋白酶還用作細(xì)胞分離和組織解離應(yīng)用中的二級(jí)酶,通常與膠原蛋白一起使用。

 

中性蛋白酶(分散酶)WBC-LS02112組成

已知該酶每g摩爾純化酶含有1g原子的鋅。如果通過(guò)EDTAEGTA等螯合劑去除這種鋅成分,則會(huì)獲得無(wú)活性的載脂酶。鈣已在純化的蛋白質(zhì)中檢測(cè)到,并被認(rèn)為在維持結(jié)構(gòu)和構(gòu)型以及防止自溶方面發(fā)揮作用(Griffin and Fogarty 1973 and Alvarez 2006)。

 

分子特性

中性蛋白酶(分散酶)WBC-LS02112由細(xì)胞外中性蛋白酶基因nprGenBank入庫(kù)號(hào)BAA00734)產(chǎn)生,該基因與枯草芽孢桿菌具有62%的同一性(Koide等人,1986)。存在單個(gè) 978 bp 開(kāi)放閱讀框,并且前序列的存在對(duì)于桿菌的所有分泌蛋白酶都是常見(jiàn)的。(竹川等人,1991年)。從Asn-287Gly-590Npr序列與中性蛋白酶序列具有相當(dāng)大的同源性,例如來(lái)自熱蛋白水解芽孢桿菌的熱溶酶(55%相同)。

 

中性蛋白酶(分散酶)WBC-LS02112應(yīng)用

組織分解和轉(zhuǎn)代培養(yǎng)

防止不必要的細(xì)胞聚集

培養(yǎng)細(xì)胞的制備

從真皮中分離完整的表皮,從基質(zhì)培養(yǎng)中分離完整的上皮片(Kurt等人,1989

正常、二倍體細(xì)胞和細(xì)胞系的收獲和轉(zhuǎn)移(Matsumura 等人,1975 年)

溫和而完整的表皮細(xì)胞分離(北野和岡田1983


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