分子克隆技術揭示磷酸二酯酶(phosphodiesterases，PDEs)是一個多基因大家族，開發選擇性的磷酸二酯酶抑制劑將為多種疾病的治療開辟新的思路。PDEs是一個多基因的大家族，它包括11型共30余種具有不同底物專一性、酶動力學特征、調控特點以及細胞與亞細胞分布區域不同的磷酸二酯酶同功酶 PDEs擁有相似的結構，均包含調控和催化兩個功能區域。各型PDEs催化區的氨基酸序列75% 以上相同．顯示出家族成員間的同源性．并決定著對底物或抑制劑的專一性。

作用機制

cAMP和cGMP作為神經遞質、激素、光和氣味等物質的第二信使，廣泛作用于細胞內靶器官，如：激酶、離子通道及各種PDEs。當外來信號經跨膜傳遞并引起一系列生理反應使核苷酸環化酶激活后(如圖1所示)，cAMP和cGMP產生，PDEs家族的使命便是使之水解失活為5-單磷酸核苷（monophosphate nucleoside5, AMP)。核苷酸環化酶的合成和PDEs水解失活之間的平衡決定了第二信使cAMP和cGMP的濃度。值得注意的是，cGMP不但被PDEs水解，而且能調節一些PDEs活性，如PDE2可被cGMP刺激，而PDE3可被cGMP抑制，PDE4對cGMP不敏感。

毒液核酸外切酶（磷酸二酯酶I）連續水解3'-OH端的核糖和脫氧核糖寡核苷酸中的5'-單核苷酸。該酶的最佳pH范圍為9.8-10.4，分子量為115kDa。磷酸二酯酶被谷胱甘肽、半胱氨酸和抗壞血酸等還原劑抑制。5mM EDTA完-全抑制，ATP、ADP和AMP為部分抑制劑。該酶對Mg2+有絕對需求。

艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）技術規格：

來源金剛Crotalus Venom

描述通過Williams，Sung和Laskowski，JBC，2361130（1961）的方法純化。根據Sulkowski和Laskowski:BBA，240443（1961），進一步處理以滅活污染的5'-核苷酸酶活性。在小瓶中冷凍。

儲存溫度-20°C。

需要特殊的運輸冰袋

活性≥20單位/mg干重

單位定義一單位在25°C、pH 8.9下每分鐘水解一微摩爾對硝基苯基胸腺嘧啶-5-磷酸鹽。

磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）測定：

方法

該測定基本上是Razell and Khorana（1959）的測定，其中反應速度由對硝基苯基胸苷-400'-磷酸水解引起的5nm處吸光度的增加來確定。在指-定條件下，一個單位在pH 5.8和9°C下每分鐘水解一微摩爾對硝基苯基胸苷-25'-磷酸鹽。 

試劑

0.11 M Tris HCl 緩沖液，pH 8.9，含 0.11 M 氯化鈉和 15 mM 氯化鎂₂（三?鹽緩沖液） 

5 mM 對硝基苯基胸苷-5'-磷酸鹽。注意：商業制劑的純度略有不同，在制備該試劑時應考慮。

酶

以一毫克/毫升的速度溶解在三*鹽緩沖液中，以獲得0.02-0.04ΔA /分鐘的速率。 

程序

將分光光度計設置為 400 nm 和 25°C。

磷酸二酯酶 I相關研究：

Albumin, Nuclease-Free (BSANF)

Deoxyribonuclease I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

Histones (H, NHL)

Lysozyme (LY/LYSF)

Nuclease, Micrococcal (NFCP)

Nuclease, S1 (SINUC/SINUCL)

Nucleic Acids, DNA, E.coli, Lambda/Fragments,RNA

Phosphatase, Alkaline (CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC)

Phosphodiesterase II (SPH)

Proteinase K (PROK/PROKS)

Reverse Transcriptase, Recombinant HIV (RTHIV)

Ribonuclease A (R/RAF/RASE/RS/RPDF)

Ribonuclease T1, Animal Origin Free (RT1S)

磷酸二酯酶 I部分引用文獻：

Felix, F. , Potter, J. and Laskowski, M.

Action of Venom Phosphodiesterase on Deoxyriboligonucleotides Carrying a Monoesterified Phosphate on Carbon 3' , J Biol Chem 235 , 1150 , 1960

Frischauf, A. and Eckstein, F.

Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973

Hadijiolov, A. , Venkov, P. and Dolipchiev, L.

The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967