SAM,也稱為 AdoMet,充當修飾蛋白質和 DNA 所需的甲基的供體。SAM 的異常水平與許多異常有關,包括阿爾茨海默氏癥、抑郁癥、帕金森氏癥、多發性硬化癥、肝功能衰竭和癌癥。
市面上,SAM甲基轉移酶酶活性分析試劑盒非常少,而且很多都是貼牌而來。如何選擇更加可靠的SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒?
艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒,提供一種連續動力學酶偶聯測定方法,可連續監測純化的SAM依賴性甲基轉移酶,而無需使用放射性標記或終點測量。 這是用于蛋白SAM甲基轉移酶的靈敏的酶偶聯試驗。
1.SAM510: SAM Methyltransferase AssaySAM甲基轉移酶活性分析試劑盒(比色法)【GBS-786-430】 100T 樣本:純化的SAM甲基轉移酶
2.SAM-fluoro: SAM Methyltransferase Assay SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒(熒光法)【GBS-786-431】100T 樣本:純化的SAM甲基轉移酶
說明:
1.試劑盒需干冰運輸,-80℃保存
2.可替代長貨期產品:Sigma,CBA096
3.僅供科研使用,不得用于醫療.
艾美捷SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒原理:
從SAM中去除甲基會產生S-腺苷同型半胱氨酸,通過所含的腺苷同型型半胱氨酸核苷酶將其快速轉化為S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤。這種快速轉化阻止了腺苷同型半胱氨酸的積累及其對甲基化反應的反饋抑制。最后,腺嘌呤脫氨酶將腺嘌呤轉化為次黃-嘌-呤,然后轉化為尿酸鹽和過氧化氫。過氧化氫的產生速率通過510nm處吸光度的增加用比色法測定。由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特異性,該測定法可適用于任何純化的SAM依賴性甲基轉移酶或產生5-腺苷高半胱氨酸或5“-甲硫腺苷的純化酶。
艾美捷SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒特色:
1.純化甲基轉移酶的動力學分析或篩選甲基化抑制劑。
2.用于動力學研究的連續酶偶聯試驗。
3.比色法,非放射性測定。
4.與所有試劑一起提供,包括陽性對照。
5.適用于產生S-腺苷高半胱氨酸或5 '-甲硫腺苷的酶。
SAM甲基轉移酶活性分析試劑盒-Nature文章鑒賞:
IF=69, 《MMSET regulates histone H4K20 methylation and 53BP1 accumulation at DNA damage sites》,Nature
體外組蛋白甲基轉移酶測定。
用血凝素(HA)標記抗體從293T細胞中表達并純化了HA-MMSET和HA-53BP1。 重組組蛋白4蛋白來自Upstate。 根據制造商的說明進行體外組蛋白甲基轉移酶測定(SAM510:SAM甲基轉移酶測定試劑盒,G-Biosciences)。 簡而言之,所有蛋白質都用0.1M Tris-HCl,pH 8.0透析。 20mM HA-MMSET(或HA-MMSET(S102A)突變體)和20mM H4(或HA-53BP1)用于每個反應。 在37 ℃下每10 - 30秒測量510nm處的吸光度,直到增加的吸光度達到平臺或通過在SDS緩沖液中煮沸終止反應,通過15% SDS-PAGE分離它們的內容物,并通過用抗H4K20Me2抗體(Upstate)進行免疫印跡來觀察H4的甲基化。
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