艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽性對照/定量標準品穩定且易于使用,在加載到凝膠上之前不需要加熱。AtpB 蛋白質標準品可與各種抗 AtpB 抗體結合使用,以定量來自廣泛物種的 AtpB。針對 AtpB 蛋白中高度保守的氨基酸序列產生了全局抗體。
艾美捷Agrisera丨AtpB | 陽性對照/定量標準品基本參數:
格式 凍干,在甘油中。
數量 100 微升
重組 如需復溶,請添加 90 µl 的 milliQ 水,請注意該產品含有 10% 甘油,可能呈液體狀,但以凍干形式提供
貯存 在 -20°C 下儲存凍干/復溶;一旦重組,制作等分試樣以避免重復凍融循環。請記住在打開試管之前先稍微旋轉試管,以避免材料粘附在試管蓋或試管側面而造成的任何損失。
測試應用 蛋白質印跡 (WB)
推薦稀釋
標準曲線:推薦 3 次加載(0.5、2 和 4μl)。
對于大多數應用,0.2μg 葉綠素的樣品負載將在此范圍內產生 AtpB 信號。
陽性對照:每孔上樣量:2μl 上樣量是大多數化學發光檢測系統的不錯之選。
請注意,本品含有 10% 甘油,可能呈液體狀,但以凍干形式提供。加水后讓其溶解幾分鐘。*但輕輕地混合 每次使用前要格外小心地*混合,因為蛋白質在冷凍后往往會沉淀在更致密的層中。
預期 | 表觀分子量:在大多數凝膠系統中,AtpB 遷移約 50-54 kDa
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽性對照/定量標準品應用示例:
圖:在4-12 % NuPage ( Invitrogen ) LDS - PAGE和_用PVDF吸干 1 小時. 在室溫下攪拌 1 小時,在 20 mM Tris、137 mM 氯化鈉 pH 7.6 和 0.1% (v/v) Tween-20 (TBS-T) 中轉移 2% 封閉試劑后立即封閉印跡。將印跡在 1: 50 000 稀釋度的一抗中在室溫下攪拌孵育 1 小時。將抗體溶液倒出并將印跡短暫沖洗兩次,然后在室溫下在攪拌下在 TBS-T 中洗滌一次 15 分鐘和 3 次 5 分鐘。將印跡在 2% 封閉溶液中稀釋至 1:50 000 的二抗(結合抗母雞 IgY 辣根過氧化物酶)中在室溫下攪拌孵育 1 小時。如上洗滌印跡并根據制造商的說明用化學發光檢測試劑顯色5分鐘。
注意:準確定量是使用每個凝膠泳道的中等上樣量實現的,通常為 0.5 至 2.5 ug 總蛋白,具體取決于目標蛋白的豐度。
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽性對照/定量標準品參考文獻:
弗雷澤等人。(2013)。集胞藻鐵饑餓過程中的光生理和光合復合物變化。PCC 6803 和細長聚球藻 PCC 7942。PLOS ONE。
Agrisera 研究包含1000種用于植物和藻類細胞生物學研究的一抗,2000多種二抗??贵w分兩大類:植物及藻類的抗體,以及細菌、真菌、昆蟲、魚等動物類抗體。艾美捷科技是Agrisera的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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