驅動蛋白是一條長80nm的桿狀結構,頭部一端有兩個成球狀的馬達結構域,另一端是重鏈((kinesin heavy chain,KHC)和輕鏈(kinesin light chain,KLC)組成的扇形尾端,中間是重鏈組成的桿狀區。球狀的頭部具有ATP結合部位和微管結合部位。大多數驅動蛋白趨向于微管的正端,在大多數細胞中,這要求將貨物(例如蛋白質和膜成分)從細胞中心向外圍運輸。這種運輸方式稱為順行運輸。
由于驅動蛋白在在細胞諸多物質運輸過程中起著至關重要的作用,對不同狀態下驅動蛋白活性檢測也有了需求,驅動蛋白通過利用ATP水解的能量沿著微管(MT)上面移動而起作用。一旦驅動蛋白結合到它預定的MT軌道上,ATPase的作用效果通常會提高幾百到幾千倍。MT激活的驅動蛋白ATPase是其運動功能的主要參數,是監測和研究各種實驗條件下驅動蛋白活性的有力方法。
那今天就來說說Cytoskeleton/艾美捷——Kinesin ELIPA™(酶聯無機磷酸鹽檢測)試劑盒。
Cytoskeleton是誰?
Cytoskeleton 專注于研究生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒。包括藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾(PTM)、細胞骨架研究相關的系列試劑盒,尤其以細胞骨架相關研究見長,既能滿足于樣品較少的科學研究,也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外,還有微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現有 藥物篩選服務。
這款試劑盒主要基于在無機磷酸鹽(Pi)的存在時,在苯胺中嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)將2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤核糖核苷(MESG)催化為2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤時在330-360 nm處發生的吸光度變化來反映驅動蛋白活性。一分子無機磷酸鹽將在不可逆的反應中生成一分子2-氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤。
全稱 cat#
ELIPA 驅動蛋白ATP酶檢測試劑盒(酶聯無機磷酸鹽測定) BK060
Cytoskeleton/艾美捷 該款試劑盒組分:包含足夠的材料,可進行96次測定。
反應緩沖液
ELIPAreagent 1(MESG)
ELIPAreagent 1(PNP)
驅動蛋白重鏈結構域(cat# KR01)
預制微管蛋白(cat# MT002)
紫杉醇(cat# TXD01)
磷酸鹽標準品
ELIPAreagent 1重懸緩沖液
ATP(cat# BSA04)
GTP(cat# BST06)
帶有詳細協議的手冊和詳盡的故障排除指南
試劑盒主要用途包括:
動力學測量微管激活的驅動蛋白ATPase的活性
驅動蛋白抑制劑的篩選現
驅動蛋白抑制劑IC50s的測定
艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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