Gibco11269-016新型二代羊水培養基操作原理及注意事項
Gibco新型二代羊水培養基 英文名稱:AmnicMAX™-II Complete Medium
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Gibco新型二代羊水培養基 英文名稱:AmnicMAX™-II Complete Medium
保存溫度:短期內4℃保存,長期儲存的話,放置-20℃
產品描述:AmnicMAX™-II Complete Medium是即用型培養基,配置用于體外培養人羊水細胞。AmnicMAX™-II Complete 是成分確定的制劑,用于改善細胞形態并提供更純凈的培養物。該產品是是第二代制劑,可優化細胞貼壁效果和生長速度、特高PH穩定性并提供豐富的分裂中期產率。這種單瓶裝的產品配有抗生素和生長促進劑,無需其他添加劑。
【檢驗原理】通過穿刺術獲得羊水胎兒脫落細胞或絨毛膜細胞,使用該培養基培養增殖后,提供后續檢測,如染色體核型分析。
【主要組成成分】基礎培養基、牛血清、谷氨酰胺、 抗生素。
【適應范圍】羊水細胞及絨毛膜細胞體外增殖培養。
【儲存條件及有效期】
培養基應貯存在-20℃,有效期為2年,溶解后應存放于2-8℃,并于1周內使用。 存放及使用時注意避光。
【生產日期與失效日期】詳見產品標簽
【使用儀器】顯微鏡、二氧化碳細胞培養箱、離心機
【樣本要求】新鮮羊水細胞或絨毛膜細胞
【檢驗方法】
采用如下方法做羊水細胞原位培養或按其它常規羊水細胞培養方法培養羊水細胞:
1. 取羊水20ml, 以120xg離心十分鐘。
2. 在無菌操作臺操作,棄上清液.
3. 加入2ml羊水培養基,輕輕 混勻,制成細胞懸液。
4. 取35mm培養皿,在蓋子上面及下半部側壁都做好標記(包括編號、姓名、日期等)。
5. 滴加0.5ml細胞懸液至培養皿中的蓋玻片(25px2)中央,用移液管尖小心攤開。注意液體不能流出蓋玻片。
6. 將培養皿置于5% CO2、濕度飽和的37度培養箱進行培養。
7. 24小時后,給每塊蓋玻片補加1.5ml培養基。
8. 接種7天后觀察細胞。當發現蓋玻片上細胞克隆數大于10個,每個克隆細胞數大于300且克隆邊沿細胞呈旺盛分裂狀態時,即可收獲細胞。否則,繼續培養1~2天。當克隆邊沿細胞融合度大于90%,呈現停止分裂狀態時,意味細胞已經老化,不適合用作分析。
9. 適合收獲的細胞按常規方法使細胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細胞片,經吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。
【參考值(參考范圍)】細胞倍增指數大于2
【檢驗結果的解釋】細胞培養時間、加入秋水仙酰胺的量以及低滲操作時間對結果影響較大,如發現制片所得的分裂相較少,需要對實驗條件及樣品進行確認。
【檢驗方法的局限性】僅用于羊水細胞、絨毛膜細胞培養。
【產品性能指標】
1. 裝量差異限度:±3%
2. 澄清度:澄清
3. PH值:7.0-7.5
4. 滲透壓(mOsm/kg):280-330
5. 無菌檢測:無菌
6. 內毒素(EU/ml):<10
7. 細胞生長實驗:細胞倍增指數大于2