凝膠凈化色譜的分類(lèi)方法和分析原理
凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來(lái)的一種分離分析技術(shù)。凝膠凈化色譜是凝膠滲透色譜主要應(yīng)用的一種,是樣品前處理的一種方法。它是一種以惰性多孔凝膠為固定相,基于尺寸排阻原理,主要依據(jù)分子尺寸大小差異使物質(zhì)分離的一種高效液相色譜方法。
凝膠凈化色譜儀分類(lèi)方法:
1、按分離目的可分:化驗(yàn)室凝膠凈化色譜儀和工業(yè)凝膠凈化色譜儀。
2、按進(jìn)樣器可分:閥進(jìn)樣凝膠凈化色譜儀和自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣凝膠凈化色譜儀。
3、按分離規(guī)模可分:小型凝膠凈化色譜儀和大型凝膠凈化色譜儀。
4、按應(yīng)用范圍可分:型凝膠凈化色譜儀和通用型凝膠凈化色譜儀。
5、按作用可分:定量分析凝膠凈化色譜儀和定性分析凝膠凈化色譜儀。
6、按分離特征可分:高選擇性凝膠凈化色譜儀、高靈敏度凝膠凈化色譜儀和高分離度凝膠凈化色譜儀。
凝膠凈化色譜儀分析原理:
一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時(shí),各分子在柱內(nèi)同時(shí)進(jìn)行著兩種不同的運(yùn)動(dòng):垂直向下的移動(dòng)和無(wú)定向的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。
大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時(shí)向下移動(dòng)的速度較快。
小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動(dòng)的過(guò)程中,從一個(gè)凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子小的后流出。