細胞凍存技術(shù)

細胞凍存是細胞培養(yǎng)實驗室常規(guī)操作，通過在低溫條件下抑制細胞的新陳代謝和生長，從而實現(xiàn)長期保存細胞的目的。一般有以下情況時我們會采用細胞凍存技術(shù)，例如，

1、細胞株需要長期保存；

2、為了規(guī)避污染風(fēng)險，將F0或者F1細胞進行凍存，即使目前傳代的細胞受到污染都能夠有新鮮細胞使用；

3、隨著細胞傳代次數(shù)逐漸增加，細胞會發(fā)生突變，為了保證前后實驗結(jié)果的一致性，可以使用同樣代次細胞；

4、細胞功能和特性研究時，細胞凍存可以保證細胞質(zhì)量；

5、為了建立細胞資源庫，需要對細胞進行凍存，以方便后續(xù)科研研究；

6、細胞治療項目中為了保證項目的延續(xù)性，凍存細胞可以持續(xù)穩(wěn)定的供應(yīng)。

由此可見凍存細胞非常重要。

實驗室常見凍存細胞多采用90%胎牛血清和10%DMSO，其次為70%DMEM、20%胎牛血清和10%DMSO。其中胎牛血清含有豐富的蛋白質(zhì)和生長因子，可以為細胞提供營養(yǎng)和保護。它還可以吸附細胞表面的冰晶，防止細胞被冰晶損傷。DMSO作為滲透性保護劑，在梯度降溫過程中隨著細胞凝結(jié)逐漸滲透到細胞內(nèi)部，降低細胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度，阻止細胞內(nèi)水分外滲，避免細胞過分脫水皺縮，減少冰晶的生成。

但是作為占比最大的胎牛血清存在批間差異、成分不明確且價格昂貴等問題，一直以來都是科研工作者極力想解決的痛點。另一方面DMSO具有毒性，凍存過程中也會導(dǎo)致一部分的細胞提前死亡。所以實驗室工作人員會選擇多凍存幾支，但是這樣也增加了血清使用量，從而導(dǎo)致整個凍存過程成本ji高。

綜上所述使用方法和痛點，逐漸出現(xiàn)了無血清無DMSO的細胞凍存液，詳情見“BioProE細胞凍存液（不含蛋白、DMSO和血清）使用方法"。