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當(dāng)前位置:上海徠同生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>細胞培養(yǎng)問題及解決方案
很多人在細胞培養(yǎng)的過程中會遇到各種各樣的小問題,現(xiàn)徠同生物針對細胞培養(yǎng)時經(jīng)常會遇到幾個問題進行一下分析:
1、細胞傳代時間比以前細胞正常傳代時間長,比如以前傳代需要一天現(xiàn)在傳代需要1.5天或者2天;
2、細胞在傳代過程中細胞形態(tài)產(chǎn)生變化,比如以前細胞正常形狀是圓形的現(xiàn)在是梭形或者細胞變瘦;
3、細胞溶液中有小黑點。
上述原因出現(xiàn)有下面兩組主要原因構(gòu)成:A 支原體污染 B血清營養(yǎng)不夠
A、支原體污染 判斷方案
同一個培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)瓶里面的細胞 在顯微鏡下逐個觀察如果有80%的細胞有小黑點可以判斷是支原體污染;
50%一下的細胞有小黑點, 可以判斷不是支原體污染而是血清營養(yǎng)不夠引起的細胞有小黑點。
B、血清營養(yǎng)不夠判斷方案
除過上述支原體污染原因外,細胞溶液中出現(xiàn)小黑點的主要原因就是培養(yǎng)細胞的血清營養(yǎng)不夠;
血清營養(yǎng)不夠會引起細胞過渡性分泌或者細胞碎片脫落,這些脫落物是形成小黑點的主要原因。
不規(guī)范血(假血清、國內(nèi)灌裝血清)清對下游實驗的影響:
因為國內(nèi)自然環(huán)境影響(霧霾))加上牛吃的草中有農(nóng)藥殘留,飼料中過度性的促進牛生長的添加劑,會引起牛血液中分泌對細胞生長可能有害的蛋白因子,從而引起科研者研究的目標(biāo)蛋白在細胞的表達量或者趨勢不對或者不表達;這個情況經(jīng)常在WB實驗中發(fā)生(研究的目標(biāo)蛋白趨勢不對或者不表達);
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