GES-1人胃黏膜上皮細胞

GES-1人胃黏膜上皮細胞

運輸及保存條件

活細胞常溫運輸,接收后請立即放入細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存細胞干冰運輸,接收后請放入液氮中保存,或立即復蘇。

細胞特性

來源:胃粘膜。

形態(tài):上皮細胞樣。

培養(yǎng)特性:貼壁生長。

支原體、細菌、真菌檢測為陰性。

wan全培養(yǎng)液主要成分

DMEM + 10% fetal bovine serum +雙抗。

使用方法

細胞復蘇

1.從液氮或干冰中取出凍存管迅速放入37℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內(nèi)使其wan全融化。

2.吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養(yǎng)液重懸細胞后接種于25 cm2培養(yǎng)瓶中,置37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞傳代

1.當細胞長到80%-90%融合時,棄去培養(yǎng)上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細胞1-2次。

2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,當細胞大部分變圓并脫落時,加入1 mlwan全培養(yǎng)液終止消化。

3.輕輕吹打后吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養(yǎng)液重懸細胞后按1:3比例接種于25 cm2培養(yǎng)瓶中,置37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞凍存

1.當細胞生長狀態(tài)良好時,棄去培養(yǎng)上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細胞1-2次。

2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,當細胞大部分變圓并脫落時,加入1 mlwan全培養(yǎng)液終止消化。

3.輕輕吹打后吸出細胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量凍存液(90% fetalbovine serum + 10% DMSO)后重懸細胞。經(jīng)逐步降溫后轉(zhuǎn)入液氮凍存。