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銅綠假單胞菌檢測原理

閱讀:447          發布時間:2017-7-18
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一、銅綠假單胞菌原理  將250mL水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾,并將濾膜移至CN瓊脂培養基上,于36℃士1℃恒溫箱中培養48h,能夠在溴化十六烷基*銨選擇性培養基上生長并產生綠膿菌素,或者能夠在溴化十六烷基*銨選擇性培養基上生長并且氧化酶呈陽性、紫外光(360±20nm)照射下能發熒光、能夠利用乙酰胺產氨的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,經證實為銅綠假單胞菌,則其檢測結果為陽性。  二、培養基和試劑  1. 假單胞菌瓊脂基礎培養基/CN瓊脂(配制好之后低溫避光保存) 2. 金氏B(King’s B)培養基(配制好之后低溫避光保存) 3. 乙酰胺肉湯(用蒸餾水配制,配置好之后低溫避光保存) 4. 營養瓊脂 5. 氧化酶試劑  6. 鈉氏試劑(配制好之后低溫避光保存) 7. 設備和儀器  8. 玻璃器具:所有玻璃器皿使用前需121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘 9. 恒溫培養箱:36℃±1℃ 10. 紫外燈:波長應為360±20nm  11. 銅綠假單胞菌濾膜:直徑47mm,微孔徑為0.45μm(處理方法:如濾膜未經滅菌,則使用前需先將 濾膜放入燒杯中,加入蒸餾水,置于沸水浴中煮沸滅菌3次,每次15 min。前兩次煮沸后需更換水,用蒸餾水洗滌2次~3次,以除去殘留溶劑。建議使用一次性無菌濾膜。)  12. 顯微鏡:10×~100×
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