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技術文章

NLRP3在肺部炎癥及大鼠肺纖維化形成密切相關

閱讀:430          發布時間:2019-5-22

       肺纖維化是間質性肺炎中*常見的一種,高發于老年人群,以胸膜下肺基底部分布為主,HRCT 上可表現為數量不等、范圍有限的磨玻璃影及網格影[1]。近年來研究發現,肺組 織損傷可導致組織蛋白酶及 ROS 大量釋放,誘導炎癥小體( NLRP3) 高表達,參與慢性炎癥形成。本實驗采用大鼠氣管滴注博來霉素制作肺纖維化模型,探討 NLRP3 在博來霉素致大鼠肺纖維化中的表達及作用機制。
1資料與方法
1. 1 一般資料
健康清潔級 Wistar 大鼠 60 只( 雌雄各半) ,6 周齡,體重 180 ~ 220 g,由哈爾濱醫科大學實驗動物學部提供。主要試劑及儀器: HE 染色試,NLRP3大鼠 ELISA 試劑盒
1. 2 實驗方法
10% 水合氯醛( 3. 5 ml / kg) 腹腔注射將 Wistar 大鼠麻醉后,仰臥固定于鼠板上,剪去頸毛并消毒皮膚,無菌操作下作 長約 1 cm 的頸中切口,逐層分離暴露氣管,彎眼科鉗經氣管下方穿過,輕抬氣管,直視下用 1 ml 注射器針頭穿刺兩軟骨環間,抬高鼠板頭端,使與桌面成 30 ~ 35 度角。保持針頭與氣道方向一致,并盡可能在氣道中央,B、D 組以 4 mg / kg 劑量一次性快速推注博萊霉素至氣管,對照組給予生理鹽水。立即拔出針頭,保持大鼠直立體位,左右來回旋轉 1 ~ 2 min,使藥液盡可能到達兩側肺部并均勻分布。手術后縫合皮膚,置 于動物室喂養。D 組大鼠于肺纖維化造模基礎上第 2 天每日腹腔注射地塞米松 3 mg / kg,N、B 組大鼠注射生理鹽水作為對照。分別于造模后第 1、7、14、28 天處死大鼠。HE 染色觀察大鼠肺組織病理變化,ELISA 法檢測肺組織IL - 37 水平,嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
1.3 采用 SPSS22. 0 軟件進行分析
實驗結果采用( x珋± s) 描述,組間多重比較應用 LSD - t 檢驗,以 P < 0. 05 為差異有統計學意義。
2結 果
2.1 大鼠肺組織病理觀察結果
N 組大鼠肺組織氣道上皮光滑,無炎性細胞滲出,肺泡壁正常,無纖維化改變。B 組與 N 組相比,氣管周圍炎細胞浸潤,肺組織大量結構破壞,肺泡間隔明顯增寬,膠原纖維沉積,

 

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