人胚肺成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人胚肺成纖維細胞分離自胚肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子、維持血管內外和凝血和纖溶的的動態平衡中起重要作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的人胚肺成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人胚肺成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

NIH:OVCAR-3細胞，卵巢癌細胞 人食管癌細胞,KYSR450細胞 豚鼠皮膚細胞;GP-S2  NXPH1 Others Rat 大鼠 NXPH1 / Neurexophilin-1 人細胞裂解液   QBC-939, 人膽管癌細胞 腎癌(瘤株),Ke-3細胞 HL-60 兔原代脾基質細胞 大鼠原代視網膜小膠質細胞

成纖維細胞生長因子4(FGF4)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated

IL21重組小鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein

CD84 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD84 蛋白

SIGLEC5重組人 SIGLEC5 蛋白 Protein

大鼠利肽受體1(NPR1)試劑盒 ，英文名： NPR1 ELISA Kit

Monkey follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit促卵泡素(FSH)試劑盒

RatIerferonα,IFN-αELISAKit 大鼠α干擾素(IFN-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGABA(MouseGamma-aminobyricacid)ELISAKit小鼠γ氨基

細胞過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學發光法定量試劑盒20次

RatProinsulin,PIELISAKit大鼠胰島素原(PI)試劑盒規格：96T/48T

線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

α戊二酸脫氫酶（α-KGDH）試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣

人胚肺成纖維原代細胞小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒

humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGA試劑盒人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒規格：96T/48T

植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒規格：96T/48T

LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein

AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原

ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白

HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白