小鼠椎間盤髓核原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠椎間盤髓核細胞分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質；周圍部的纖維環，由多層纖維軟骨環按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結構的一部分，位于兩軟骨板與纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構成髓核的主要物質是大量蛋白多糖復合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核細胞采用膠原酶-蛋白酶混合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

大鼠腸靜脈內皮細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88 肝癌細胞，BEL-7405細胞 MEF細胞，早代小鼠胚胎成纖維細胞  DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 人原代聽神經瘤細胞永生化細胞 大鼠原代角膜基質細胞

POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)重組蛋白 Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

GSK3B重組小鼠 GSK3B 蛋白 Protein

PDCD1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 (Fc 標簽)

TNFRSF19重組人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠芳烴受體核轉位因子樣蛋白1(ARL)試劑盒 ，英文名： ARL ELISA Kit

Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 豬可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

牛特定基因序列(Bovine)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMAGAb(Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody)ELISAKit人抗髓鞘相關糖蛋白抗體

體液(NO)活性熒光定量試劑盒50次

ELISAKitEMP紅細胞膜蛋白

小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒   96T/48T

小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒   96T/48T

小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒   96T/48T

小鼠血管緊張素轉換酶（ACE）試劑盒   96T/48T

小鼠椎間盤髓核原代細胞小鼠(FA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 人可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 人芳香烴受體(AhR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor16-AlphaOHE-1(Human16-AlphaHydroxyesogen1)ELISAKit人16α羥基雌同1

飲料鎂離子濃度酶反應光譜法定量試劑盒20次

MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒規格：96T/48T

LEP重組人 Leptin 蛋白 Protein

糖原0酸化酶M(PYGM)重組蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

AOC1重組人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 標簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。