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證明轉(zhuǎn)化細(xì)胞具有異種嵌合的能力的方法
閱讀:376 發(fā)布時(shí)間:2018-3-6轉(zhuǎn)化細(xì)胞具有多潛能的分化能力,能夠在體內(nèi)、體外分化成不同類型的細(xì)胞、組織甚至器官。通過干細(xì)胞的異種嵌合技術(shù)在豬等大動(dòng)物體內(nèi)實(shí)現(xiàn)異種再造器官。然而,人類胚胎干細(xì)胞在異種體內(nèi)分化潛能尚不*清楚,細(xì)胞存活、分化識別、發(fā)育時(shí)程等關(guān)鍵問題仍未解決,依然存在嚴(yán)重的技術(shù)壁壘。
近日,中國科學(xué)院動(dòng)物研究所胡寶洋、李偉、周琪研究組合作,通過在Primed狀態(tài)人類胚胎干細(xì)胞中過表達(dá)抗凋亡基因BCL2及BCL2L1,并在小鼠四細(xì)胞發(fā)育時(shí)期進(jìn)行胚胎注射,獲得了Primed狀態(tài)人胚胎干細(xì)胞嵌合的人-鼠異種嵌合小鼠胚胎,并證明其同時(shí)具有胚內(nèi)、胚外組織的嵌合能力。此項(xiàng)工作將為開展人類胚胎干細(xì)胞異種嵌合研究,并zui終獲得能夠移植的人類器官提供新的方法和思路。
該研究首先將Primed狀態(tài)的人類胚胎干細(xì)胞過表達(dá)BCL2、BCL2L1兩個(gè)抗凋亡基因,并將其注射到四細(xì)胞期的小鼠早期胚胎中。研究發(fā)現(xiàn),過表達(dá)BCL2、BCL2L1基因的人胚胎干細(xì)胞在小鼠胚胎中的細(xì)胞凋亡水平顯著降低,顯著提高其在小鼠早期胚胎中的貢獻(xiàn)比例。進(jìn)一步研究揭示,人胚胎干細(xì)胞在小鼠體內(nèi)具有三胚層的分化能力,在嵌合體發(fā)育的E10.5天分化還可成為功能細(xì)胞,且人干細(xì)胞的嵌合比例可高達(dá)1%。
值得注意的是,該研究在異種嵌合囊胚的滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞(TE)及后續(xù)分化的胚外組織中檢測到人胚胎轉(zhuǎn)化細(xì)胞的貢獻(xiàn),證明Primed狀態(tài)人胚胎干細(xì)胞具有向胚外組織發(fā)育的能力。上述研究通過提高Primed狀態(tài)人胚胎干細(xì)胞的抗凋亡能力證明其具有異種嵌合的能力,這為利用人胚胎干細(xì)胞制備異種嵌合體的研究提供新思路,也為進(jìn)一步研究人類胚胎干細(xì)胞多能性狀態(tài)的調(diào)控機(jī)制提供了指導(dǎo)。
對照品 馬來酸麥角新堿 50mg 對照品
對照品 咪唑 50mg 對照品
對照品 吡喹酮 50mg 對照品
對照品 馬來酸氯苯那敏 50mg 對照品
對照品 氫溴酸東莨菪堿(毒) 50mg 對照品
對照品 氫溴酸加蘭他敏 50mg 對照品
對照品 炔雌醇 50mg 對照品
對照品 炔諾酮 50mg 對照品
對照品 4-N-去甲基安乃近 500mg 對照品
對照品 曲安奈德 50mg 對照品
對照品 去乙酰毛花甙(毒) 50mg 對照品
對照品 乳糖 200mg 對照品
轉(zhuǎn)化細(xì)胞