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細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類(lèi)方法
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊?xì)胞內(nèi)的技術(shù)。那你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類(lèi)方法是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！
一、根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在的時(shí)間長(zhǎng)短，可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染：指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。
細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細(xì)胞分裂過(guò)程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組，因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其子代細(xì)胞的基因組中會(huì)同時(shí)保留轉(zhuǎn)染的DNA。
由于穩(wěn)轉(zhuǎn)效率較低，因此選用有效的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法很重要。
二、根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為化學(xué)，生物，物理方法
化學(xué)方法：利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。如陽(yáng)離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)等技術(shù)。
生物方法：利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細(xì)胞中。現(xiàn)在比較多見(jiàn)的是各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。
物理方法：在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生一個(gè)瞬時(shí)的孔從而導(dǎo)入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。
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