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抗原/免疫原發現和優化
疫苗開發中的免疫原發現流程
不同疫苗開發平臺(比如滅活病毒與DNA疫苗)之間的工作流程千變萬化,各有各的優勢。CEPI(Coalition for Epidemic Preparedness Innovations),以及許多的其他機構,在*性流行病中推動了這些多樣化的對策以增加對抗感染源的成功率。
這里,我們重點介紹了利用重組蛋白作為免疫原開發疫苗的通用工作流程,其中提到的系統可以幫助您的研究工作。
1 篩選免疫原
采用噬菌體展示的方法篩選病毒抗原,作為潛在的疫苗候選物。
2 免疫原表征
免疫原性研究確認上述步驟發現的抗原是否會激發免疫反應。如果抗原激發免疫反應(常用ELISA檢測),那么這個抗原就被認為免疫原而繼續研究。更多的表征工作用于在后續的蛋白質改造工程中將目標屬性引入免疫原。
3 蛋白質(免疫原)改造工程
免疫原的一些屬性會導致注射入動物或人后出現不良反應。因此,需要使用一些基因編輯工具,如CRISPR/Cas9,改造免疫原的DNA基因,從而消除這些屬性。
4 細胞轉染和克隆
待DNA序列優化后,需要放大免疫原的生產用于后續測試。在這個階段,構建高表達、單克隆源性的細胞株非常關鍵。這個階段涉及基因工程、轉染以及單細胞克隆,尤其是采用哺乳動物細胞株作為宿主細胞。
5 篩選表達量和質量屬性
在單細胞克隆后,監測細胞的生長并評估表達量。純化并制備免疫原用于動物注射以激發免疫反應。待動物產生抗體后,通過病毒中和試驗評估疫苗效力。
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