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冬季所取的樣品由于試驗溫度設在20℃，使得溶解氧過飽和，夏季所取的樣品在20℃時溶解氧可能欠飽和。在BOD5測定前應對這些樣品進行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調節到20℃飽和點左右。
應調節試驗水樣的PH值為6.7～7.5（*點為PH 7.2），BOD5讀數下降可能是由于正在試驗樣品的PH值超出了這個范圍，含有大量酸或堿的樣品，BOD5讀數可能會低于實際含量。
酸性或堿性水樣應用適當濃度的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸中和。所用調節液體積不超過水樣體積的0.5%，如果超過，可加大調節液的酸堿濃度，以減少調節液體積。
實驗時將主機放置在20℃±１℃的培養箱中。BOD的測定也能超出這一溫度范圍，例如，有實驗證明在35℃測定BOD所需要的時間可以縮短為2.5天，其測定結果與五日20℃相似。提高溫度所獲得的BOD值與五日20℃條件下測定的結果有很好的相關性。
如果在采樣時樣品溫度超過20℃，或樣品溫度不足20℃，可將樣品放在培養箱中恒溫。在樣品測定前要求對樣品進行處理。
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