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急性髓系細胞白血病細胞;KG-1*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
急性髓系細胞白血病細胞;KG-1*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 KG1細胞系由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立。骨髓抽自一個59歲的患有紅白血病而后又發展成急性骨髓原性白血病的男性白人。 KG1細胞在形態上類似急性髓原白血病,表現為明顯的多形化,骨髓母細胞和骨髓細胞占優勢。 少量細胞是成熟的粒細胞,也有微量的巨噬細胞和嗜曙紅細胞。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的Tectorigenin 鳶尾黃素 規格: 20mg/支 進口/國產
Tectoridin 鳶尾苷 規格: 20mg/支 進口/國產 射干苷
Schizandrin A 五味子甲素 規格: 20mg/支 進口/國產
Schizandrin B 五味子乙素 規格: 20mg/支 進口/國產
Schisandrol A 五味子醇甲 規格: 20mg/支 進口/國產
Schisantherin B 五味子酯乙 規格: 20mg/支 進口/國產
Schisantherin A 五味子酯甲 規格: 20mg/支 進口/國產
Schisandrol B 五味子醇乙 規格: 20mg/支 進口/國產
Crocin 西紅花苷 規格: 20mg/支 進口/國產 藏紅花素;番紅花苷
犬C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞皮質酮(CS)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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