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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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貨號 | GOY-01X0305 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X0305 |
名稱 SW1116 (結腸腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 SW-1116; SW 1116
種屬 人類
年齡(性別) 男性,73歲
組織來源 結腸腺癌Ⅲ期
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 SW1116細胞CSAp陰性(CSAp-)、結腸抗原3陰性;SW1116細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌基因檢測表明,SW1116細胞c-myc、K-ras、H-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性,未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達。SW1116還表達腫瘤特異的核基質蛋白CC-4、CC-5和CC-6。
生物安全等級 1
生長培養基 Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~96-144小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,100%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice.
抗原表達情況 Blood Type O, Rh+
基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 2654 ng/10^6 cells/10 days; keratin
注意事項 1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養基進行培養,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會產生細胞毒性; 2、如您沒有無二氧化碳的培養箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養基時即可正常通入5%二氧化碳; 2、配套專用培養基默認Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,請聯系銷售下單備注更改。
保藏機構 ATCC; CCL-233 ECACC; 87071006
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Forskolin( 腺苷酸環化酶激活劑 )1mg Catalase( 抗氧化酶 )200mg
Genistein( 蛋白激酶抑制劑 )25mg Carboxy-PTIO( 清除劑 )5mg
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g Carboxy-PTIO( 清除劑 )50mg
GSH( 抗氧化劑 )1g Canavanine,sulfate(iNOS 抑制劑 )100mg
H-89.2HCL(PKA 抑制劑 )5mg Camptothecin( 喜樹堿 )100μL
鳥H5N1 IgG抗體ELSIA 試劑盒免費代測
獼猴骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa檢測試劑盒
家蠶卵黃蛋白(LT)elisa檢測試劑盒
鯽魚卵黃蛋白原(VTG)elisa檢測試劑盒
核黃素轉運因子3(RFT3)elisa檢測試劑盒免費代測
SW1116 (結腸腺癌細胞)大鼠白介素27(IL-27)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠白介素28B(IL-28B)elisa分析檢測試劑盒
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