雜交瘤細(xì)胞株；FABP 4C2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；FABP 4C2圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
HSP71  熱休克蛋白71抗體規(guī)格: 0.1ml
CDX1  尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgG規(guī)格: 0.1ml
ACY 3/HCV-HCBP1  丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體規(guī)格: 0.2ml
TRPM3  瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白3抗體（M亞家族）規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.5ml
phospho-GSK3 Alpha(Ser21)  磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體規(guī)格: 0.1ml
Annexin I  膜粘連蛋白 I抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
BARD1  腺易感基因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
hnRNP M/CEAR  異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
GAP43  神經(jīng)生相關(guān)蛋白43規(guī)格: 0.1ml
GFRAL  膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgG規(guī)格: 0.3ml
Phospho-FLT3 (Tyr589/591)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3規(guī)格: 0.1ml
HDHD1  HDHD1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml總谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒    100 次     18-0730-100
SSPE 溶液 ,20×    100mL    100809-100
0.1mL×10        TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
100mL        非凍型組織 DNA 保存液
5mg        胃蛋白酶抑制劑
100 次        植物種屬鑒定 PCR Mix 2
聚乙烯吡咯烷酮 40000    100g    CAS9003-39-8
Western 印跡膜洗膜液    250mL    81211-250
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    3000U    130699-3000
5g        牛血清白蛋白
250mg        Calcein Blue 
100mL        非凍型血液 DNA 保存液
100mL        茜素紅 S 染色試劑盒
一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )    100 T    18-0620-100
溴化乙錠干粉 (EB)    1g    100808-1
100 次        神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒
100 次        DNA 快速連接試劑盒
500 次        BCA 法蛋白定量試劑盒
1套        克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫(kù)構(gòu)建試劑盒
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶    80U    130645-80