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    上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
    中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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    雜交瘤細(xì)胞株;FABP 4C2圖片

    參  考  價(jià)面議
    具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

    產(chǎn)品型號(hào)

    品       牌ATCC

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

    所  在  地上海市

    更新時(shí)間:2017-01-23 13:49:34瀏覽次數(shù):274次

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    雜交瘤細(xì)胞株;FABP 4C2圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

    雜交瘤細(xì)胞株;FABP 4C2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

    細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株;FABP 4C2圖片
    形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
    生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
    特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
    培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
    傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
    傳代情況 C5
    凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
    支原體檢測(cè) 陰性
    STR 
    同工酶 
    染色體 
    使用權(quán)限 未定

    細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
    一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
    1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
    2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
    3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
    二、細(xì)胞處理:
    1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
    2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
    2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
    3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
    4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
    3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
    質(zhì)量保證:    
    我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
    操作步驟:
    1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
    2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

    Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
    HSP71  熱休克蛋白71抗體規(guī)格: 0.1ml
    CDX1  尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體規(guī)格: 0.2ml
    Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgG規(guī)格: 0.1ml
    ACY 3/HCV-HCBP1  丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體規(guī)格: 0.2ml
    TRPM3  瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白3抗體(M亞家族)規(guī)格: 0.2ml
    Rabbit Anti-dog IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.5ml
    phospho-GSK3 Alpha(Ser21)  磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體規(guī)格: 0.1ml
    Annexin I  膜粘連蛋白 I抗體規(guī)格: 0.1ml
    Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
    BARD1  腺易感基因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
    hnRNP M/CEAR  異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體規(guī)格: 0.2ml
    Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
    GAP43  神經(jīng)生相關(guān)蛋白43規(guī)格: 0.1ml
    GFRAL  膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
    Mouse Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgG規(guī)格: 0.3ml
    Phospho-FLT3 (Tyr589/591)  磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3規(guī)格: 0.1ml
    HDHD1  HDHD1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml總谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒    100 次     18-0730-100
    SSPE 溶液 ,20×    100mL    100809-100
    0.1mL×10        TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
    100mL        非凍型組織 DNA 保存液
    5mg        胃蛋白酶抑制劑
    100 次        植物種屬鑒定 PCR Mix 2
    聚乙烯吡咯烷酮 40000    100g    CAS9003-39-8
    Western 印跡膜洗膜液    250mL    81211-250
    RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    3000U    130699-3000
    5g        牛血清白蛋白
    250mg        Calcein Blue 
    100mL        非凍型血液 DNA 保存液
    100mL        茜素紅 S 染色試劑盒
    一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )    100 T    18-0620-100
    溴化乙錠干粉 (EB)    1g    100808-1
    100 次        神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒
    100 次        DNA 快速連接試劑盒
    500 次        BCA 法蛋白定量試劑盒
    1套        克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫(kù)構(gòu)建試劑盒
    8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶    80U    130645-80

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