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小鼠雜交瘤細胞;AE-2價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細胞;AE-2價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 動物用純化的人紅細胞乙酰膽堿脂酶免疫。 脾細胞與gp2/O-Agl4骨髓瘤細胞融合。 產生的抗體與人及猴的乙酰膽堿脂酶結合,但反應位點與AE-1(ATCC HB-72)的抗原決定簇不同。 檢測發現短肢畸形(鼠痘)病毒陰性。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Leukotriene C4 (50 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTC4; Leukotriene C4
11-dehydro Thromboxane B2-d4 (100 ug)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 11-keto TXB2-d4; 11-dehydro Thromboxane B2-d4
12(S)-HETE (25 ug)12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 12(S)-HETE
9(R)-HODE (50 ug)9R-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
96-Well Solid Plate (white) (1 ea)96-Well Solid Plate (white)
Cortisol Express AChE Tracer (100 dtn)Cortisol Express AChE Tracer
8-Isoprostane EIA Standard (1 ea)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Standard
13(S)-HpOTrE(γ) (500 ug)13S-hydroperoxy-6Z,9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE(γ)
Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate (1 ea)Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate
Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM) (5 ea)CBA sEH Inhibitor (10 mM); Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM)
Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0) (500 mL)TBE Buffer; Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0)
PAF C-16 (100 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Plaet-activating Factor C-16; PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol (10 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glyceryl ester; 2-AG; 2-Arachidonoyl Glycerol
Oleyl Trifluoromethyl Ketone (10 mg)1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Sodium Phosphate Assay Buffer (10 ml)Sodium Phosphate Assay Buffer
SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent (1 ea)SIRT6 (human recombinant); SIRT6 (human recombinant) Direct Assay ReagentDenhardt 溶液,50×100mL
大提柱式植物 DNAout4次
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U
CAS62625-32-5溴甲酚綠1g
12-213X33 酵母菌種1mL
一站式 GST 標記蛋白質微量純化套裝20 次
克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
糖原Ⅱ型1g
MEM 培養基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )500mL
DNA Tris HCl,1M,pH8.5100mL
140624-20雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE·7-AAD) 20 次
90602F-50DNA 電泳分子量標準 (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
十二烷基磺酸清除劑25mL
動態顯色法內毒素定量試劑盒48 次
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽100g
Sephacryl S-400 基質10mL
CAS9001-62-1脂肪酶5g
100539-1胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液,20mg/mL1mL
柱式酵母 DNAout50 次
MMLV 逆轉錄酶 (H-)1000U
apo- 轉鐵蛋白10mg
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