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人肺癌細胞;A549 圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺癌細胞;A549 圖片
形態特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系是1972年由Giard DJ通過肺癌組織移植培養建系的,源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂;角蛋白陽性。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN9
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:13;D21S11:29;D2S1338:24;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14;
同工酶
染色體 62-66
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
L- 苯丙氨酸10g
DNA Shuffling 試劑盒10 次
CAS369-07-3鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
130585-100小鼠抗 CBP 標簽單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 10100 次
L- 脯氨酸25g
纖連蛋白 ( 人血 )1mL
B-5 固定液250 mL
CAS7761-88-8硝酸銀25g
100910-10長效期 SDS-PAGE 還原劑10mL
離心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
半乳糖氧化酶150U猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠脂聯素(ADP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠內毒素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠抗IgE受體抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62/GMP140)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
菜豆凝集素(PHA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬抗凝血酶受體(ATR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
植物纖維素酶(CE)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組織因子(TF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠鼠痘毒抗體(MPV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
NF-κB 激活-核轉運檢測試劑盒50 次
CAS9001-12-1膠原酶Ⅱ型100mg
131150-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記1000μL
130978-50柱式血清血漿 RNAout50 次
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸10g
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