人成骨肉瘤細(xì)胞；well2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 人成骨肉瘤細(xì)胞；well2圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

RNA  Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )100g
CuZn/Mn-SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 )100 次
氨芐青干粉1g
4mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè)
130862-10DAPI 干粉10mg
130518-2醛基磁珠2mL
SMD1168 酵母菌種1mL
DH5αλpir 菌種1mL
miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次
MG1655 菌種1mL
111009-50端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒 (TRAP)50 次
70605-30miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）20 次
Doxorubicin(Adriamycin) 阿100μL
四鹽酸精胺1g
草桿菌 PCR Mix 4100 次
CAS2580-78-1活性藍(lán) 19100mg
130567-1000β-Tubulin 小鼠單抗1000μL
71207-10RNA 洗脫液10mL
p19siRNA 結(jié)合蛋白 1000U人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人雌激素(E)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素17A(IL-17A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人D-乳酸（D-LAC）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬甲狀腺素(T4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鵝過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPARγ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠趨化因子(FK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝