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轉(zhuǎn)化細胞周期測定實驗

時間:2018/6/21閱讀:366
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實驗方法原理

體外培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細胞生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數(shù)來表示。它與生長曲線有一定的,如隨著分裂指數(shù)的不斷提高,細胞也就進入了指數(shù)生長期。

分裂指數(shù)指細胞 群體中分裂細胞 所占的百分比,它是測定細胞 周期的一個重要指標,也是不同實驗研究選擇細胞的重要依據(jù)。

實驗材料

細胞

試劑、試劑盒

胰酶甲醇培養(yǎng)液冰醋酸Giemsa染液

儀器、耗材

CO2培養(yǎng)箱普通顯微鏡培養(yǎng)皿蓋玻片吸管
實驗步驟

一、消化細胞 ,將細胞 懸液接至內(nèi)含蓋玻片的培養(yǎng)皿中。

二、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時,使細胞長在蓋片上。

三、取出蓋片,按下列順序操作:

PBS漂洗3分鐘→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分鐘→Giemsa液染色10分鐘→自來水沖洗。

四、蓋片晾干后反扣在載玻片上,鏡檢。

五、計算

分裂指數(shù)=分裂細胞 數(shù)/總細胞 數(shù)×100%

收起 

注意事項

1.  操作時動作要輕,以免使蓋片上的轉(zhuǎn)化細胞脫落。

 phospho-AMPK beta 1(Ser182) 巨噬細胞炎癥蛋白18抗體

 phospho-AMPK gamma 1 (Tyr307) 巨噬細胞炎性蛋白抗體

 phospho-AMPK gamma 1 (Tyr308) 巨噬細胞炎性蛋白20抗體

 phospho-ANAPC1 (Ser355) 巨噬細胞炎性蛋白1β抗體

 phospho-ANAPC1(Ser377) 巨噬細胞炎性蛋白1α抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser210) 巨噬細胞炎性蛋白19抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser213) 巨噬細胞炎性蛋白16抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser580) 巨噬細胞炎性蛋白15

 phospho-Androgen Receptor (Ser595) 巨噬細胞清道夫受體抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser650) 巨噬細胞克隆刺激因子抗體
轉(zhuǎn)化細胞

 

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