【方法】ATCC細(xì)胞用海藻酸鈉和氯化鈣固定綠色木霉，將游離綠色木霉和固定化綠色木霉分別培養(yǎng)一段時(shí)間，離心培養(yǎng)液，用分光光度計(jì)法檢測(cè)上清液中纖維素酶活性。在上清液中加入濃縮的小球藻懸浮液，用顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)胞壁破碎的小球藻。

【結(jié)果】綠色木霉能同時(shí)分泌內(nèi)切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及 β-1,4 葡萄糖苷酶 3 種纖維素酶，其中外切葡聚糖酶活性zui高。固定化綠色木霉反復(fù)使用 5 次后，分泌的纖維素酶活性能保持到初次的 67.4%。市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉初次及第 5 次分解小球藻細(xì)胞壁的效率分別為 47.3%、86.5%、81.5%、52.1%。

【結(jié)論】市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉都能分解小球藻細(xì)胞壁，其中固定化綠色木霉因可重復(fù)使用，具有潛在的應(yīng)用前景。

小球藻(Chlorella sp.)是一種普生性單細(xì)胞綠藻，含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類及脂肪，其中不飽和脂肪酸的含量較高，且含有二十二碳六烯酸 (DHA)。另外，小球藻還具有特殊的功能成分—— 小球藻活性生長(zhǎng)因子(CGF)，CGF 具有抗衰老、活化人體細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力，有效抑制變異癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，抵抗外來(lái)病毒入侵；減輕因藥物等有機(jī)物、鉛、砷、汞等重金屬造成的毒害等功能。

我國(guó)養(yǎng)殖的小球藻主要有：普通小球藻 (Chlorella vulgaris)、橢圓小球藻(Chlorella ellipsoidea)和蛋白核小球藻(Chlorella py-renoidosa)。不論哪種小球藻，細(xì)胞壁均非常堅(jiān)硬，對(duì)其有效破壁一直是個(gè)難題。小球藻雖然營(yíng)養(yǎng)豐富，若細(xì)胞壁不破碎，其有效成分難以獲取，應(yīng)用價(jià)值因此而受到影響。目前，破碎小球藻細(xì)胞壁的方法主要為物理法，如研磨法、機(jī)械勻漿法、交替凍融法、超聲波破碎法、高壓均質(zhì)法。

ATCC細(xì)胞這些方法或因破壁效率不高、或因破壁時(shí)間較長(zhǎng)、或因破壁過(guò)程中高溫對(duì)細(xì)胞活性物質(zhì)的損害等原因，在實(shí)際應(yīng)用中受到了不同程度地限制。小球藻細(xì)胞壁的主要成分是纖維素，若能將纖維素分解，則細(xì)胞壁也將被破碎。分解纖維素zui有效、zui溫和的催化劑是纖維素酶。綠色木霉是自然界分泌纖維素酶zui強(qiáng)的真菌之一。本文研究了綠色木霉分泌物對(duì)小球藻細(xì)胞壁的酶解作用。
beta-Eudesmol    beta-桉葉醇    473-15-4    20mg
Betulin    白樺脂醇； 樺木醇    473-98-3    20mg
Brazilin    巴西蘇木素; 蘇枋精    474-07-7    20mg
Daucosterol    胡蘿卜苷    474-58-8    20mg
Campesterol    菜油甾醇    474-62-4    10mg
Nuciferine    荷葉堿    475-83-2    20mg
ATCC細(xì)胞