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      上海李記生物CCK-8試劑盒為進口分裝產品，與日本同仁提供的CCK-8試劑盒幾乎*一模一樣，二者的實驗差異極小，但產品價格卻不到日本同仁cck-8的一半，保證質量的同時，擁有！我們的技術員及領導有著將近30年的科研經驗，知道哪些試劑能在市場中具有優勢的同時保證實驗人員在實驗中能真正感覺到產品的質量，我們在此鄭重承諾：如果產品質量和日本同仁CCK-8相差較大，全額退款。

  產品說明   

      Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)，WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜（formazan，參考圖1)。WST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

圖1：WST-8分子結構及檢測原理

運輸與保存方法:

冰袋運輸。CCK-8在4℃可保存一年，在-20℃可以存放數年，反復凍融會造成測定背景O.D值升高，如經常使用，建議存放于4℃即可。

操作方法:

1. 在96孔板中配制100 μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時 (在37℃，5% CO2的條件下)。

2. 向培養板加入10 μl不同濃度的待測物質。如果測定細胞活性，則不需要2-3步驟，直接從第四步操作。

3. 將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6,  12, 24或48小時)。

4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響O.D值的讀數)。

5. 將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

6. 用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。

注意事項:

1）CCK-8試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化反應，如果待檢測體系中有較多還原劑（或抗氧化劑）會造成背景O.D值升高，干擾檢測結果。如果實驗中有還原劑，請檢查背景的O.D值，即測定、比較空白培養基加入藥物與不加藥物的培養基（含細胞）在加入CCK- 8試劑后的O.D值，如果空白O.D值明顯偏高，則說明有反應，應設法去除或折算干擾因素。

2）如果細胞培養時間較長，培養基顏色發生變化，應洗滌細胞更換培養基后再加CCK-8檢測。細胞培養基酚紅不影響測定結果。

3）為使CCK-8試劑盒培養基充分混勻，減少CCK-8在移液器上的殘留，建議加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑，混勻后加樣。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 CCK-8與同類試劑比較