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如何選擇液相色譜柱保護柱?
液相色譜柱保護柱分類及選擇:
從材質上分:不銹鋼材質和PEEK(聚醚醚酮)材質
PEEK 材質優缺點--樣品對金屬離子比較敏感時,選擇PEEK材質比較合適,比如某些蛋白分析會用到PEEK材質的分析柱,主要就是考慮到這方面的因素;
不銹鋼材質優缺點--大部分小分子化合物的分析,選擇不銹鋼材質保護柱居多,特別是當流動相體系使用到si氫呋nan(THF)或DMSO等一些溶解性較強的溶劑時,必須選擇不銹鋼材質,甚至對于HPLC系統的管路也需要替換成不銹鋼材質,因THF對于PEEK管路有相當強的腐蝕作用。
從結構上分:卡套式(柱芯+柱套)和直接填裝短柱
直接填裝短柱優缺點--這種結構的保護柱實質就是短的色譜柱,一般填裝的填料跟分析柱填料*一樣。生物樣品分析中,用這種類型保護柱居多,除可過濾一些不溶顆粒外,還可除去一些在分析柱上易吸附的雜質。缺點是,一次性使用,污染嚴重時,只能報廢。
卡套式保護柱優缺點--卡套式保護柱的柱套可反復使用,柱芯污染后可替換,廠家會提供配套的保護柱芯,但購買時需要注意,柱芯中有與分析柱匹配的填料,需要確認柱芯中的填料類型再購買。同時,柱芯和柱套需是來源于同一廠家的同一規格,否則,會存在匹配上的差異,導致峰型異常或者漏液。
從連接方式上分:獨立式和直連式
獨立式保護柱優缺點--保護柱和分析柱之間用一段管路連接,不用擔心與分析柱在連接上的匹配問題。但使用管路連接時,連接不當容易產生死體積。
直連式保護柱優缺點--保護柱接口帶螺紋,可直接與分析柱連接,死體積小,UPLC分析時建議選擇直連式保護柱;缺點:購買時需保證接口與分析柱匹配。
液相色譜柱保護柱選擇考慮以下幾方面因素:
1. 除非特殊情況,一般選擇填料基質與分析柱基質*相同的保護柱。
2. 選擇保護柱尺寸可按柱體積計算,保護柱體積按分析柱體積的5%~10%即可;如4.6*250mm的分析柱體積約為4mL,保護柱體積可選擇在0.2~0.4mL之間為宜。同時,保護柱內徑應與分析柱內徑相同或相當。