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液相色譜填料技術的發展方向
液相色譜(HPLC)是一種現代分離、分析方法。20世紀60年代以來,HPLC作為一種分析技術在生命科學、環境科學、藥物分析等領域的應用 日益普遍。其中色譜填料可謂是色譜技術的核心,它不僅是色譜方法建立的基礎,而且是一種重要的消耗品。色譜柱作為色譜填料的載體,當之無愧被稱為色譜儀器 的“心臟”。高性能的液相色譜填料一直是色譜研究中豐富、有活力、富于創造性的研究方向之一。
硅膠基質的色譜填料因為其優異的色譜性能是目前應用的液相色譜填料,尤其是針對有機小分子的分離和分析,硅膠基質的色譜填料占據絕大多數的*。近些年,這個領域激動人心的進展是基于以下二個方向的快速液相技術的發展。
1、超液相色譜(UHPLC)填料技術
從2004年Waters公司推出UPLC儀器,超液相色譜技術以其快速、高分離度和高靈敏度的優勢得到了廣泛的應用。而這種技術的核心是基于亞 2µm小粒徑硅膠的色譜填料。當填料顆粒小于2µm時,不僅柱效明顯提高,而且隨著流速的增加,分離效率并不降低。采用高流速可將分離速度和峰容量擴展到一個新的極限,但同時柱壓也顯著升高。小粒徑填 料需要使用壓力更高的超液相色譜儀系統,對色譜柱的生產工藝也有更高的要求,必須解決色譜柱的裝填難度大、柱頭容易漏液、填料容易堵塞等問題。目前,除了色譜儀器和色譜柱公司(如Waters、Agilent、Phenomenex)生產UHPLC色譜柱,國內的色譜柱廠家也陸續推出此類產 品。雖然UHPLC儀器還是壟斷市場的情況, 但是國產的UHPLC色譜柱已經可以取代進口品牌。
2、核殼型色譜填料
核殼型(core-shell)色譜填料是由色譜科學家 JackKirkland 在2006年研制成功的一種新型色譜填料。它是將多孔硅殼熔融到實心的硅核表面而制備的。這些多孔的“光環”狀顆粒具有極窄的粒徑分布和擴散路徑,可以同時減小軸向和縱向擴散,允許使用更短的色譜柱和較高的流速以達到快速、高分辨率分離。并且,核殼型色譜柱所產生的反壓明顯低于UHPLC色譜柱,低反壓可以使儀器承受壓力降低,使得在常規的液相儀上就能夠實現超液相儀的分離效果。但是,核殼型色譜柱對儀器的柱外死體積要求高、且柱容量小于全多孔色譜填料,因而并不適用于大規模的制備液相分離需求。