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深圳欣博盛生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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B-Xpander™為臨床研究和免疫療法釋放B細(xì)胞擴(kuò)增的能量

時(shí)間:2025/4/11閱讀:176
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最近在使用工程化B細(xì)胞或腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TILs)的免疫療法中,B細(xì)胞的擴(kuò)增引起研究人員越來(lái)越多的關(guān)注。目前用于B細(xì)胞擴(kuò)增的方法效率低、時(shí)間長(zhǎng),并且會(huì)導(dǎo)致B細(xì)胞數(shù)量不足和T細(xì)胞持續(xù)衰竭。Adipogen推出的B-Xpander™蛋白通過(guò)模擬B細(xì)胞上CD40L和CD40分子之間的自然相互作用,改進(jìn)了目前B細(xì)胞刺激方案。

 

B-Xpander™是一種有效的增強(qiáng)型多聚體人CD40L細(xì)胞因子,用于B細(xì)胞活化、B細(xì)胞擴(kuò)增和細(xì)胞治療應(yīng)用。Adipogen使用專-利方法和經(jīng)鑒定并認(rèn)證的CHO細(xì)胞系進(jìn)行生產(chǎn),可提供類似GMP形式的具有超高活性的多聚體人CD40L蛋白。

 

B-Xpander™的特點(diǎn):

• 使用經(jīng)過(guò)鑒定和認(rèn)證的可用于GMP級(jí)別生產(chǎn)的CHO細(xì)胞系進(jìn)行生產(chǎn)

• 通過(guò)ELISA和基于細(xì)胞的檢測(cè)方法測(cè)試的高生物活性

• 通過(guò)SEC驗(yàn)證具有高純度和均一性

• 低內(nèi)毒素水平

• 批次間一致性好

• 無(wú)動(dòng)物成分來(lái)源

• 生產(chǎn)過(guò)程不使用交聯(lián)劑

 

B-Xpander™具有多聚體人CD40L蛋白的結(jié)構(gòu),其中人CD40L胞外結(jié)構(gòu)域(aa 116-261)通過(guò)ACRP30的膠原結(jié)構(gòu)域人工連接。來(lái)自小鼠脂聯(lián)素的ACRP30無(wú)頭多聚化結(jié)構(gòu)域序列允許B-Xpander™的多聚化(10-12 x三聚體)。B-Xpander™非常有效地模擬了人CD40L在體內(nèi)的天然膜輔助聚集,是in vitro和 ex vivo應(yīng)用的理想選擇。

B-Xpander™或多聚體人CD40L的結(jié)構(gòu) 

圖1.B-Xpander™或多聚體人CD40L的結(jié)構(gòu)

 

應(yīng)用實(shí)例

B 細(xì)胞擴(kuò)增(增殖)

B-Xpander™與其他級(jí)別的多聚人CD40L一樣可以有效提升人原代CD19+ B細(xì)胞的增殖。與市場(chǎng)上大多數(shù)重組CD40L蛋白不同,Adipogen的B-Xpander™和多聚體CD40L蛋白不需要增強(qiáng)子(抗體)就能進(jìn)行多聚體化和激活。

B細(xì)胞增殖檢測(cè) 

圖2. B細(xì)胞增殖檢測(cè)

通過(guò)人原代CD19+ B細(xì)胞的增殖來(lái)測(cè)定B-Xpander™和2種不同科研級(jí)別多聚體hCD40L的活性。細(xì)胞(5 x 10^4/孔)在RPMI培養(yǎng)基、谷氨酰胺、10%胎牛血清、人IL-4(10ng/ml)、人IL-21(10ng/ml)和不同濃度的B-Xpander™ CD40L (human) (rec.) (Animal-Free) (#AG-40B-0010AF),CD40L (human) (multimeric) (rec.) (CSG; Certified Serum Grade) (#AG-40B-0010CSG), CD40L (human) (multimeric) (rec.) (#AG-40B-0010),或?qū)φ盏鞍着囵B(yǎng)條件下。4天后使用PMS/MTS (ellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, Promega)對(duì)細(xì)胞增殖進(jìn)行定量。4天后細(xì)胞擴(kuò)增10倍,達(dá)到5×10^5/孔。

 

B 細(xì)胞激活

B-Xpander™也非常適用于B細(xì)胞的激活:B-Xpander的多聚體結(jié)構(gòu)模擬了膜結(jié)合人CD40L的生物活性,是一種高效的B細(xì)胞激活因子。B-Xpander是激活人類CD40的最-有效融合蛋白替代物。使用B-Xpander,不需要增強(qiáng)子(抗體) 就能實(shí)現(xiàn)多聚化和超高活性。

B-Xpander™ (Prod. No. AG-40B-0010AF)誘導(dǎo)B細(xì)胞活化 

圖3.B-Xpander™ (Prod. No. AG-40B-0010AF)誘導(dǎo)B細(xì)胞活化。

將PBL細(xì)胞在96孔板(2x10^5 cells/孔,含10%FCS的100μl RPMI細(xì)胞培養(yǎng)基)中于37°C下培養(yǎng)24小時(shí),培養(yǎng)液中含有指-定濃度的B-Xpander™ CD40L (human) (rec.) (Animal Free) (#AG-40B-0010AF), CD40L (human) (multimeric) (rec.) (#AG-40B-0010)或三聚體人CD40L作為對(duì)照。用PBS洗滌細(xì)胞,并分別用2μl CD86-PE和CD19-FITC(在50μl FACS緩沖液(PBS,5%FBS,0.02%疊氮化物)中)在4度避光條件下染色20分鐘。用FACS緩沖液洗滌兩次后,通過(guò)流式細(xì)胞儀分析樣品。

 

B細(xì)胞擴(kuò)增在過(guò)繼性細(xì)胞治療中的作用

在ACT(Adoptive Cell Therapy,過(guò)繼細(xì)胞療法)過(guò)程中,從患者的血液或腫瘤組織中分離出T細(xì)胞,體外擴(kuò)增和活化,然后重新輸回患者體內(nèi),以靶向清除癌細(xì)胞。T細(xì)胞可以被改造成表達(dá)識(shí)別腫瘤特異性抗原的嵌合抗原受體(CARs)或T細(xì)胞受體(TCRs ),或者它們可以被擴(kuò)增以富集具有天然腫瘤特異性反應(yīng)性的腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞(TILs, tumor-infiltrating lymphocytes)。然后,患者的腫瘤細(xì)胞可以與擴(kuò)大的TILs相互作用,以篩選可以殺死腫瘤細(xì)胞的效應(yīng)TILs。

最近,研究者發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞在ACT中是一個(gè)新的關(guān)鍵角色。TILs浸潤(rùn)的B細(xì)胞越多,TIL的擴(kuò)增和激活越好。用B-Xpander™刺激和擴(kuò)增并裝載腫瘤特異性抗原的B細(xì)胞可提高腫瘤特異性TILs的數(shù)量。

TILs擴(kuò)增的ACT工作流程 

圖4.TILs擴(kuò)增的ACT工作流程

 

產(chǎn)品訂購(gòu)詳情

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

蛋白特點(diǎn)

B-Xpander™系列

AG-40B-0010AF

B-Xpander™ CD40L (human) (rec.) (Animal Free)

• 在經(jīng)過(guò)鑒定和認(rèn)證的CHO細(xì)胞中使用無(wú)動(dòng)物成分的培養(yǎng)基生產(chǎn)

• GMP-like生產(chǎn)

• 可用于細(xì)胞治療的離體B細(xì)胞擴(kuò)增

定制產(chǎn)品

B-Xpander™ CD40L (human) (rec.) (GMP-Grade)

• CRO公司的GMP生產(chǎn)

• 可用于細(xì)胞治療的離體B細(xì)胞擴(kuò)增

其他研究級(jí)別

AG-40B-0010

CD40L (human) (multimeric) (rec.)

• 在CHO細(xì)胞中使用標(biāo)準(zhǔn)血清/培養(yǎng)基產(chǎn)生

• 用于科研級(jí)別的離體B細(xì)胞擴(kuò)增

AG-40B-0010CSG

CD40L (human) (multimeric) (rec.) (Certified Serum Grade)

• 使用經(jīng)認(rèn)證的CHO細(xì)胞血清/培養(yǎng)基生產(chǎn),以實(shí)現(xiàn)可追溯性

• 用于科研和細(xì)胞治療的離體B細(xì)胞擴(kuò)增

 

 

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