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支原體是最小和最/簡單的自我復制生命體。由于支原體體積小（100 nm），缺乏剛性的細胞壁，因此肉眼無法檢測到支原體，它們可以透過一般過濾膜，并對很多抗生素都具有抵抗力。支原體污染是細胞培養中的一個主要問題，不止影響實驗結果的有效性，更會影響細胞工程制藥的質量和安全性。
支原體的特征：
支原體屬于柔膜菌綱，其成員特征為缺乏細胞壁以及擁有多變的形態。支原體對包括原代細胞在內的所有真核細胞類型具有高度傳染性。成百上千的支原體可以附著在一個細胞上，與細胞膜融合、繁殖，最終數量可以超過培養細胞1000倍。支原體可以*改變細胞特性和扭曲研究結果。而支原體脂蛋白可被Toll樣受體2（TLR2）識別并激活免疫細胞。支原體沒有細胞壁的特點使它們對常用的抗生素（如青霉素和鏈霉素）產生抗性。此外，它們的尺寸微小（~100nm），能夠穿透過0.2μm的標準過濾膜。因此，我們需要采取預防措施來防止細胞培養物受到污染。
支原體污染對細胞功能的主要影響：
支原體與宿主細胞競爭營養素和代謝物前體。因此，它們能改變許多細胞功能，影響到細胞代謝和細胞生長，最終導致細胞死亡。通過對受污染的人源細胞進行微陣列分析，科學家發現支原體嚴重影響數百個基因的表達，當中包括受體、離子通道、生長因子和致癌基因。一旦與宿主細胞膜粘附或融合，支原體可以通過干擾信號級聯和細胞因子產生，進一步損害細胞。這些有害效應會強烈干擾實驗數據，導致研究結果無效，特別是當涉及表達TLR2的免疫細胞時，如巨噬細胞。
檢測支原體的 5 大原因：
1.珍貴細胞系的損失
2.對數據可靠性和再現性的嚴重影響
3.大多數學術期刊都要求進行測試
4.全球高達35%的污染率，包括細胞庫
5.時間和金錢的損失
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