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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2018-11-2 閱讀(2430)
(1)復制方法 雄性小鼠，體重為25～30g。
1)SAH的復制 經腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(60mg/kg體重)麻醉，手術區域皮膚消毒。切開分離右側股動脈并插管，以備抽取60μl自體血進行顱內注射用(在顱內注射60μl的量時外漏少，且鼠死亡率低)。小鼠頭部前傾30°，頭頂后部正中切口，暴露頭骨。選用30號穿刺針從腦后下部中線向左向下45°穿刺進入枕大池。由股動脈抽取60μl自體血(隨后腹腔注射60μl生理鹽水以補充正常體液量)緩慢注入枕大池，持續時間約1min。當注入20μl時，動物呼吸出現異常，注入到60μl時，可能發生呼吸暫停。注射結束后立即使動物頭前傾75°，持續10min，以使血液在枕大池內擴散開來。緩慢抽出穿刺針，創面點滴2～3滴(按2.50×10000U/ kg體重的劑量)慶大霉素，結扎股動脈并抽出插管，仔細縫合切口以防腦脊液和血液外漏。手術期間保持動物體溫在37℃。動物于術后1h清醒并逐漸恢復正常攝食，正常術后死亡率<5％。
2)腦血管造影檢查 可分別于SAH后1, 6, 12h和1, 1.5, 2, 3, 4, 5和7d進行腦血管造影：經左心室插管，以5.5ml/min的速度灌注10％甲醛溶液2min，采用立體顯微攝像測量大腦前動脈、大腦中動脈和基底動脈。
3)組織學檢查 動物先以0.1mol/L的磷酸緩沖液灌洗，隨后以4％多聚甲醛和含有2.5％的谷氨酸鹽混合的0.1mol/L的磷酸緩沖液灌洗，速度為5.5ml/min。迅速摘除鼠腦并繼續固定在上述液體中(4℃)24h，分離大腦前動脈、大腦中動脈和基底動脈，做0.5μm厚度的切片，甲苯胺藍染色。
(2)模型特點 在SAH后2d內大腦前動脈和基底動脈上方、大腦中動脈附近均有血凝塊，大腦前動脈周圍血凝塊多且清除緩慢，腦頂部血凝塊在SAH 3～4d后基本消失。大腦前動脈在SAH后1h開始收縮，其直徑可減少30％～40％，并持續1～3d，至第7日時，血管直徑逐漸恢復正常。大腦中動脈和基底動脈在SAH后6h收縮達20％～25％，并持續1～1.5d。病理組織學檢查可見，在SAH 1d后，血管壁的內彈性層明顯皺縮、管腔狹窄、管壁增厚。血管的平滑肌細胞無明顯異常。準確的操作可避免腦干、脊髓和小腦的損傷。
(3)比較醫學 截至目前，還沒有一個可以模仿人類DCV的動物模型。根據Schwartz的描述，良好的DCV模型應具有：①持續性的蛛網膜下腔出血。②出血量可控。③出血機制酷似血管瘤的破裂。④血液的分布與蛛網膜下腔出血一致。⑤容易操作且價格合理。理想的實驗方法應該是直接刺破血管壁，使血液流出。然而此種方法動物死亡率很高。此模型采用直接枕大池注血模擬了血管瘤破裂的方式，血液分布與SAH相似，并引起持續的血管痙攣，病理變化與人類DCV相似。而且具有重復性好、操作簡便、成本低、死亡率低的特點。
