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豬凋亡誘導因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗步驟

閱讀:1058        發布時間:2015-5-8

豬凋亡誘導因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗步驟:

1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值

大于標準品孔*孔的 OD 值) ,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5) 。

5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6、底物請避光保存。

7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9、本試劑不同批號組分不得混用。

10、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

豬凋亡誘導因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬凋亡誘導因子(AIF)水平。用純化的豬凋亡誘導因子(AIF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凋亡誘導因子(AIF),再與HRP標記的凋亡誘導因子(AIF)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凋亡誘導因子(AIF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬凋亡誘導因子(AIF)濃度。

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