僅供科研使用，不可用于臨床診斷和治療

凍存細胞接收后的處理：

1）干冰運輸，收到細胞后推薦直接復蘇，轉(zhuǎn)入液氮暫存可能導致細胞復蘇率降低；

2）收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。

復蘇細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。

2）75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片。

3）鏡檢觀察細胞密度未達到80-90%時，將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，離心后棄去上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。

4）如您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關問題，出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務。

注：發(fā)貨用培養(yǎng)基不可再次用來培養(yǎng)細胞

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①收集所有細胞懸液，1000rpm離心5min，小心棄去上清；

②用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶或者60MM培養(yǎng)皿中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存

①收集所有細胞懸液，1000rpm離心5min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

②將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。