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本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細胞發生凋亡時，染色質會固縮。Hoechst33342可以穿透細胞膜，染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜，對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞，其細胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光，壞死細胞為強紅色熒光＋強藍色熒光。參考下圖，左圖為誘導凋亡前的正常細胞，右圖為誘導凋亡后的細胞
染色快速方便，兩種染料的染色僅需20-30分鐘，一步染色即可完成。 使用方便，使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。 本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數量可以為1×105-1×106。
細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
產品內容： 細胞染色緩沖液 100ml Hoechst染色液 0.5ml PI染色液 0.5ml 說明書 1 份
使用說明：
1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內，離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1ml細胞染色緩沖液重懸。
2. 加入5微升Hoechst染色液。 3. 加入5微升PI染色液。 4. 混勻，冰浴或4℃孵育20-30分鐘。 5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。 6. 如果使用熒光顯微鏡檢測，檢測前離心沉淀細胞，用PBS洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測，可以不收集細胞，直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀查。
注意事項：
需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。 Hoechst 33342對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性，請注意適當防護。 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
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