NTSR1/CHO NTSR1/CHO NTSR1/CHO
| I. Background | |
| 神經(jīng)緊張素（NTS）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種神經(jīng)遞質(zhì)/調(diào)節(jié)劑，也是外周的一種激素。 它由腸粘膜中的內(nèi)分泌細(xì)胞釋放，經(jīng)肝臟代謝，并參與胃腸道的多種功能。NTS 能夠抑制 胃酸分泌和調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)，NTS 還在消化道癌癥等多種癌癥中發(fā)揮致癌作用。 神經(jīng)緊張素（NTS）通過(guò)與兩種受體結(jié)合：NTSR1 和 2 （GPCR）和 NTSR3/sortilin。神經(jīng)緊張素受體 1 （NTSR1）是一種由內(nèi)源性肽配體調(diào)控的 A 類 GPCR，NTS 激活后， NTSR1 偶聯(lián)各種信號(hào)效應(yīng)器，包括 G 蛋白的幾種亞型、GRKs 和β-Arrestins，介導(dǎo)中樞神 經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)傳遞和神經(jīng)調(diào)節(jié)。NTSR1 已被認(rèn)為是成癮、肥胖、鎮(zhèn)痛、癌癥、帕金森病和 精神分裂癥的藥物靶點(diǎn)。SBI-553 是 NTSR1 的β-Arrestin 偏向變構(gòu)配體，可拮抗 G 蛋白信 號(hào)，選擇性地減少成癮行為，而不會(huì)產(chǎn)生低血壓、低體溫和運(yùn)動(dòng)障礙等不良副作用，這些 副作用通常與 NTS 誘導(dǎo)的 NTSR1 的平衡激動(dòng)作用有關(guān)。此外，NTS 與 NTSR1 的 Gαq11 亞基結(jié)合觸發(fā) PLC-γ的激活，從而導(dǎo)致 IP3 和 DAG 的產(chǎn)生， 觸發(fā)細(xì)胞內(nèi) Ca 2+的動(dòng)員和 PKC 的激活，導(dǎo)致 NFκB 轉(zhuǎn)錄因子的激活。NTS 也可以誘導(dǎo) Rho GTPases、FAK 和原癌基 因蛋白激酶 Src 的激活，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)和細(xì)胞遷移。 | |
| II. Description | |
| cAMP 在 G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中是一種關(guān)鍵的第二信使。當(dāng)配體結(jié)合 到 GPCR，構(gòu)象發(fā)生變化，激活受體接著激活 G 蛋白，Gs 的激活導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶調(diào)控 cAMP 的升高。 NTSR1 還可以通過(guò) Gq 蛋白的信號(hào)通路，調(diào)控 IP1 的升高。NTSR1 與配體結(jié)合，導(dǎo)致 Gαq 亞基的激活，觸發(fā) PLC-γ，從而產(chǎn)生兩個(gè)第二信使：IP3 和 DAG，它們參與細(xì)胞內(nèi)鈣 動(dòng)員。由于 IP3 在代謝上不穩(wěn)定，因此測(cè)量通路激活的替代標(biāo)志物 IP1 作為檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。 NTSR1 CHO 細(xì)胞藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) NTSR1 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，原理見(jiàn)下圖所示。  Figure 1. NTSR1 CHO 細(xì)胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | CHO |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Expressed Gene: | NTSR1 |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | F12K+10%FBS+5ug/ml puromycin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): | Functional assay for NSTR1 |
| Transducer: | Gs+Gq |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Hamster |
| Tissue: | Ovary |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
Figure 2. Recombinant NTSR1/CHO stably expressing NTSR1. | |
Figure 3. HTRF cAMP Assay with NTSR1 CHO (C27). | |
Figure 3. HTRF IP-one Assaywith NTSR1 CHO (C27). | |
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