我們在使用液相色譜儀的時候,經常會很粗心的犯一些自己都不容易發現的問題,今天小編就針對液相色譜儀的流動相使用時常犯的錯誤進行一個總結。
1.加入有機相之后再測量流動相的PH值
通常情況下測量流動相的PH值,是測量水相中的PH值參數。有機相加入之后PH值參數的測量就和之前有誤差。但如果能保證每次測量都是加入相同量的有機相之后得到的PH值,雖然這不能保證jing確度,但是這能保證前后一致的測量結果,所以這樣也沒有問題。
2.不使用緩沖鹽
緩沖鹽的加入是用來控制和修正流動相中PH值的改變的。樣品基質、空氣中的CO2、水中的雜質都會造成流動相PH值的改變,而PH值的改變會影響樣品的保留、峰形、峰面積參數。
3.沒有在正確的緩沖區間使用緩沖鹽
每個緩沖鹽都有一定的緩沖范圍,在此范圍內它提供了*佳的pH穩定性。在這個范圍外,緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以要么在正確的范圍內使用緩沖鹽,要么選擇一個緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽。
4.向有機相中加入緩沖鹽
如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會大大增加緩沖鹽析出的風險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產生一定影響。
5.梯度洗脫時直接用泵去混合流動相并且流動相比例從0%開始
現在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的出現氣泡和沉淀的風險。
6.沒有使用正確的pH值修飾酸或堿作為緩沖液
緩沖溶液的修飾酸或堿,只使用生成緩沖鹽的酸或堿。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調節。
7.沒有在方法中說明緩沖液的全部信息
例如只在方法中寫“稱5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。緩沖鹽的類型決定其pH緩沖范圍,而緩沖鹽中所需物質的濃度決定了緩沖強度。例如:5g的無水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強度,會影響保留率。
8.使用儀器時不調查之前使用的流動相情況,直接用純有機溶劑沖系統
如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒有經過調查就直接在B通道使用了純的有機溶劑,那么就會造成該通道緩沖鹽析出、出現堵塞等風險。
9.將溶劑瓶中的流動相用干為止
溶劑瓶中的流動相如果用干,會導致儀器中出現氣泡等問題。
10.僅使用超聲來給流動相脫氣
超聲脫氣有一定的脫氣作用,但*脫氣的效果并不理想。所以在此建議使用真空脫氣機進行在線脫氣。
這10個關于液相色譜儀流動相的常規錯誤你記住了嗎,在實驗操作過程中一定要規避,避免造成對實驗結果的不準確行。
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