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介紹PCR儀的三種控溫模式
閱讀：1964 發(fā)布時間：2022-4-20
PCR，中文稱為聚合酶鏈式反應，其實是一種DNA的快速擴增技術，PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用，可以在3個小時內把特定的DNA量提高1000萬倍。PCR技術引起了分子生物學研究的一場革命，推動了微觀領域的生物學研究。現在PCR儀已經被廣泛地應用于生命科學研究、食品衛(wèi)生、醫(yī)療、法醫(yī)及環(huán)境監(jiān)測等諸多方面。
在進行PCR儀中控溫模式設定時，一般有三個選項：Block、Tube及Probe。下面就這三種模式種簡單的介紹：
PCR儀的溫度傳感器一般是在模塊下面的，也就是說儀器實際能夠控制的是模塊的溫度，Block模式指的就是儀器以控制Block的溫度為目的，也就是說你輸入95度5分鐘，則模塊的溫度達到95度后開始計時，5分鐘后完成。這是最基本的控溫模式。
但是，實際上我們輸入95度5分鐘是希望PCR管內的溫度達到95后開始計時5分鐘。PCR儀器開發(fā)人員可以先將模塊溫度控制到97度（比如而已，如果不超過95度，管內溫度可以很長時間才能達到95度或根本達不到），過幾秒鐘后，等到管內溫度達到95度，再將模塊溫度降到95度。這樣做既達到了管內溫度到95度，且速度較快。但過沖的溫度量與時間及PCR管的導熱系數、PCR反應液的體積都有關系。這就是各個PCR儀廠家的核心技術了。這種控溫方式就稱為Tube模式。
如果直接將一個溫度傳感器加入PCR管中，直接測量PCR管內的溫度不是也可以嗎？這就是Probe模式，也就是在一個不進行PCR反應的管內放入一個溫度探頭，儀器根據溫度探頭測到的溫度來控制PCR管內的溫度。但傳感器的數據檢測、分析及反饋是需要時間的，這種控制模式不一定比Tube模式好，而且如果反應體積發(fā)生變化時，就比較麻煩了。
因此，如今的PCR儀就都是Block和Tube兩種模式了。如果是正常的PCR反應，一般選Tube模式。如果是長時間保溫且對溫度過沖要求很高，則可以考慮用Block模式。