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轉染試劑主要作用是輔助將質粒、DNA、siRNA、miRNA或蛋白質等外源物質輸送到細胞內部，目前已成為研究和控制真核細胞基因功能的常規試劑。令人擔憂的是，現在市面上的轉染試劑種類繁多，質量參差不齊，那我們應該如何選擇一款適用于自己實驗的轉染試劑呢？

作為一名以前也常用轉染試劑做實驗的老師姐，我認為非常有必要拿出我很愛的一款轉染試劑推薦給大家。一款專門用于昆蟲細胞的轉染以及高滴度重組桿狀病毒的生產的轉染試劑。

昆蟲細胞表達是一種用于產生具有簡單翻譯后修飾的蛋白質的平臺。瞬時轉染和重組桿狀病毒的產生是昆蟲細胞表達的常用方法。TransIT®-Insect是一種無動物來源的轉染試劑，專門針對各種昆蟲細胞類型的高基因表達進行了優化。

產品性能：

• 特殊的DNA遞送—在昆蟲細胞類型中，包括Sf9、High Five™ 和S2

圖1. 使用TransIT®-Insect高效轉染桿狀病毒基因組DNA。6孔板里進行轉染，每孔5 x 105 Sf9細胞，質粒和轉染試劑比例1：3，使用0.5ug表達GFP的ProGreen™桿狀病毒表達載體（AB Vector）和0.1 µg的pVL1393 轉移載體(AB Vector). (A)轉染后6天使用Zeiss S100熒光顯微鏡拍攝熒光和相位對比圖像。(B) Merge。

圖2. TransIT®-Insect的性能優于競爭對手的轉染試劑。昆蟲細胞系（A）Sf9，（B）High Five™, 和（C）果蠅S2細胞，在96孔板中用0.1µg由hr5增強子/IE1啟動子驅動的熒光素酶表達質粒進行轉染，使用指ding試劑以zhi定試劑與DNA的比例（µl:µg）轉染。在轉染后48小時測量螢光素酶的表達。Sf9和High Five™在無血清培養基配方中培養和轉染細胞；S2細胞在含有血清的培養基中。誤差條表示三次復孔平均值的標準誤差。

• 桿狀病毒產量高—昆蟲細胞中表達桿狀病毒的理想選擇

圖3. 使用TransIT®-Insect在High Five中的高效表達重組蛋白 。在6孔板中用2.5µg由hr5增強子/IE1啟動子驅動的GFP表達質粒轉染進High Five™ 細胞（Thermo Fisher Scientific） 。從轉染后72小時的細胞制備總可溶性細胞裂解物。通過SDS-PAGE和考馬斯藍染色分析來自100µl培養物的裂解物；cells alone（未轉染）作為對照。

GFP-6XHis-S-HSV（*，~38kDa）在來自用TransIT®-Insect（Mirus Bio）轉染的細胞

用TransIT®-Insect 和DNA比例為2:1進行轉染，觀察到高水平的表達。在轉染細胞的裂解物中清楚地檢測到含有6X His、S和HSV標簽（~38kDa）的表達GFP（*）。

圖4. 使用TransIT®-Insect高效表達蛋白。昆蟲細胞系(A) Sf9，(B) High Five™和(C)果蠅S2在96孔板中轉染 0.1 ug的熒光素酶表達質粒，轉染試劑與質粒的比例為2:1。在轉染后24、48和72小時三個時間點檢測熒光素酶的表達。Sf9和High Five™細胞在無血清培養基中培養和轉染；S2細胞置于含血清的培養基中。

• 血清兼容—無動物來源的非脂質體配方，

• 性價比高—每次轉染所需的試劑量較低

部分應用文獻展示：

#1：Establishment of a Pseudovirus Platform for Neuraminidase Inhibiting Antibody Analysis.International Journal of Molecular Sciences (2023) 24:2376

Cell line：sf21

#2：MicroRNA miR-274-5p Controls Melanotic Mass Formation and Developmental Growth by Regulating the Found-in-Neurons-JNK Signaling Axis in Drosophila.Preprints (2023).

Cell Type: S2

#3：Baculovirus actin-based motility drives nuclear envelope disruption and nuclear egress.Current Biology (2018).

Cell line : High Five

#4：miR-34-5p, encoded by Spodoptera frugiperda, participates in anti-baculovirus by regulating innate immunity in the insect host.International Journal of Biological Macromolecules (2022) 222:2190

Cell Type: S9

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