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信帆教你如何使用大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒

時(shí)間:2017-3-9閱讀:1766
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信帆教你如何使用大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒

大鼠C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein ,CRP)是指在機(jī)體受到感染或組織損傷時(shí)血漿中一些急劇上升的蛋白質(zhì)(急性蛋白)。CRP可以激活補(bǔ)體和加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬而起調(diào)理作用,從而清除入侵機(jī)體的病原微生物和損傷,壞死,凋亡的組織細(xì)胞,在機(jī)體的天然免疫過(guò)程中發(fā)揮重要的保護(hù)作用。

信帆教你如何使用大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒

關(guān)于CRP的研究已經(jīng)有70多年的歷史,傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為CRP是一種非特異的炎癥標(biāo)志物,但近十年的研究揭示了CRP直接參與了炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病,并且是心血管疾病zui強(qiáng)有力的預(yù)示因子與危險(xiǎn)因子。

注意事項(xiàng):

1)在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。
2)我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。1-3天左右檢測(cè)的樣本可儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩H缬刑厥庠蛐枰芷谛允占瘶?biāo)本,請(qǐng)將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或- 70℃條液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
A、檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。
B、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5)組織標(biāo)本:

切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

人類C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein ,CRP)是指在機(jī)體受到感染或組織損傷時(shí)血漿中一些急劇上升的蛋白質(zhì)(急性蛋白)。CRP可以激活補(bǔ)體和加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬而起調(diào)理作用,從而清除入侵機(jī)體的病原微生物和損傷,壞死,凋亡的組織細(xì)胞,在機(jī)體的天然免疫過(guò)程中發(fā)揮重要的保護(hù)作用。關(guān)于CRP的研究已經(jīng)有70多年的歷史,傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為CRP是一種非特異的炎癥標(biāo)志物,但近十年的研究揭示了CRP直接參與了炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病,并且是心血管疾病zui強(qiáng)有力的預(yù)示因子與危險(xiǎn)因子。

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