鐵離子比色法檢測試劑盒
描述：鐵是人體必需的元素之一，對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就
會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細胞內，各組織、器官包括各內分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和
肺組織內含量較為豐富。成人體內含鐵 3～5 克，大部分都以蛋白質復合物形式存在，極少部分以離子的
形態存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子，線性范圍 5~300uM。產品包括標準品和空
白對照，本試劑盒可進行 100 個樣品的檢測。
規格：100 次
儲存：4℃保存 6 個月有效
操作步驟：
1. 樣品準備（以 24 孔板為例）：
將含鐵元素DMEM培養過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩遍，將PBS吸棄（若不馬上檢測可將其凍存于-20℃）。
200ul/孔裂解液裂解細胞，置于搖床裂解 2h。
2. 標準品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將 3mM 的標準品母液稀釋為：300 uM、150uM、75uM、
37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設置 0 濃度對照反應管。
3. 將緩沖液與 4.5%高錳酸鉀溶液按 1:1 混勻，稱為混液 A。 注意：高錳酸鉀溶液需要自備。
4. 參考下表使用 1.5ml 離心管，設置空白對照管、標準品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高，
用裂解液適當稀釋后再進行測定。
空白對照 稀釋后的標準品 裂解的樣品
稀釋用液 100μl －
混液 A 100μl 100μl 100μl
樣品 － － 100μl
標準品工作液 － 100μl －
5. 混勻，60℃ 孵育 1h。
6. 冷卻至室溫，將管蓋與管壁上的液滴離心入管底。
7. 加入 30ul 鐵離子檢測劑，混勻，室溫孵育，30min。
8. 取 200ul 于 96 孔板，在 550nm 測定吸光度。如果不能測定 550nm，也可以在 540nm~580nm
范圍內檢測。
9. 繪制標準曲線并計算鐵離子濃度。
說明：
1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的干擾。
2. 操作過程中，樣品與試劑等避免與鐵器接觸，以防污染。
3. 所測樣本的值高于標準曲線的上限，應稀釋樣品后重新測定。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作，檢測試劑有腐蝕性，請小心操作，若不慎沾到
皮膚上請馬上用清水沖洗干凈。
5. 該試劑盒僅供科學研究使用。
